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一步一步教你使用NCBI查找DNA、
mRNA、cDNA、Protein、promoter、引
物设计、BLAST序列比对等
最近看到很多战友在论坛上询问如何查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用
BLAST进行序列比对……,这些问题在NCBI上都可以方便的找到答案。现在我就结合我
自
己使用NCBI的一些经历(经验)跟大家交流一下BCBI的使用。希望大家都能发表自己
的使
用心得,让我们共同进步!
我分以下几个部分说一下NCBI的使用:
Partone如何查找基因序列、mRNA、Promoter
Parttwo如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列
Partthree运用STS查找已经公布的引物序列
Partfour如何运用BLAST进行序列比对、检验引物特异性
特别感谢本版版主,将这个帖子置顶!
从发帖到现在,很多战友对该帖给与了积极的关注,在此向给我投票的(以与想给我
投票却暂时不能投票的)各位战友表示真诚的感谢,谢谢各位战友!
请大家对以下我发表的内容提出自己的意见。关于NCBI其他方面的使用也请水平较高
的战友给予补充
Firstofall,还是让我们从查找基因序列开始。
第一部分利用Mapviewer查找基因序列、mRNA
序列、
启动子(Promoter)
下面以人的IL6(白细胞介素6)为例讲述一下具体的操作步骤
1.打开Mapviewer页面,网址为:
在search的下拉菜单里选择物种,for后面填写你的目的基因。操作完毕如图所示:
..
.
2.点击“GO”出现如下页面:
3.在步骤二图示的右下角有一个QuickFilter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene
前面的小方框里打勾,然后点击Filter.出现下图:
..
.
说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。2、下面参考序列给出了
三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。尽管
你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序
列。现在普遍采用的是最上面的那个序列,这一条是世界范围的生物科学家用计算机合成的
一个序列。我也推荐大家使用这个序列。
4.点击上述三条序列第一条序列(即reference)对应的)对应的,出现新的页面,
页面下方为:
..
.
5.点击上图出现的Download/ViewSequence/Evidence“”,即下载查看序列等功能,
结果如图所示:
先对上面这张图做点简要的说明,在SequenceFormat(序列输出格式)后面是一个下
拉式选择菜单,默认的为FASTA格式,还有一个是GenBank格式。我推荐大家选择
GenBnak
格式,因为这个格式提供了很多该基因的信息,而FASTA格式只有基因序列。
6.在SequenceFormat后选择GenBank,然后点击下面的Display,目的基因的相关
信息和序列就出现在眼前了。点击后如图所示(网页较大,只抓取一小部分以作示范):
..
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