红细胞血型及相关检测 (2).ppt

思考题ABO血型鉴定的方法有哪些？正反定型结果不一致的原因有哪些？如何解决？交叉配血试验的方法有哪些，各方法的原理是什么？如何选择和评价？第61页,共62页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第62页,共62页，星期六，2024年，5月间接Coombs试验抗人免疫球蛋白同种异型抗体第29页,共62页，星期六，2024年，5月2不完全抗体可以结合在红细胞表面,但是不能和两个红细胞同时结合（致敏）。3加入抗人球蛋白1红细胞彼此之间有一定的间距4抗人球蛋白可以同时和两个不完全抗体的FC段结合，从而把红细胞连接在一起抗人球蛋白交叉配血法示意图第30页,共62页，星期六，2024年，5月抗球蛋白配血方法患者献血者主侧次侧37℃?37℃水浴30分钟三洗第31页,共62页，星期六，2024年，5月抗球蛋白方法配血方法加抗球蛋白离心看结果阳性阴性第32页,共62页，星期六，2024年，5月结果判读直接抗球蛋白试验阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管凝集，判定为阳性阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管不凝集，需要做阴性确认后判定结果（无凝集的被检管中加入IgG抗-D致敏红细胞后离心，出现凝集判阴性，否则重新试验阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，结果不可信不发报告，分析原因重做第33页,共62页，星期六，2024年，5月间接抗球蛋白试验阳性对照管呈现凝集反应，阴性对照管未呈现凝集反应，被检管呈现凝集反应为阳性结果，被检者血清内含有抗体，如果自身对照无凝集，同种抗体；如果被检者结果阴性，被检者血清中未被查出意外抗体。阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管出现凝集，实验失败。结果判读第34页,共62页，星期六，2024年，5月抗球蛋白试剂不纯假阳性假阴性红细胞洗涤已凝集红细胞质量不抗凝标本漏加试剂红细胞、血清及试剂质量洗涤不充分操作过程不连续离心过度红细胞过多或过少血清浓度过大孵育时间和温度不当前带现象间接抗球蛋白试验盐水保存不当红细胞直抗阳性第35页,共62页，星期六，2024年，5月（三）低离子聚凝胺介质交叉配血试验是一种快速、简便、红细胞不完全抗体的方法多数IgG抗体能够被检出，但IgG抗-K抗体除外汉族至今未发现K抗原阳性，也未检出抗-K抗体第36页,共62页，星期六，2024年，5月聚凝胺介质试验技术红细胞表面带有大量的负电荷，悬浮在电解质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，形成zeta电位。第37页,共62页，星期六，2024年，5月红细胞表面电荷及其相互之间的距离第38页,共62页，星期六，2024年，5月原理聚凝胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云再加入聚凝胺溶液，溶解后产生很多正电荷，中和红细胞表面带有的负电荷，红细胞zeta电位降低，缩短红细胞距离，产生非特异性聚集最后加入悬浮液，具有中和聚凝胺阳离子的作用，使正常红细胞的非特异性凝集散开，特异性凝集仍然存在第39页,共62页，星期六，2024年，5月1红细胞间有一定间距2加入聚凝胺后，可以缩短红细胞之间的距离，使其非特异性凝集3加入枸橼酸钠，可以中和聚凝胺4红细胞的非特异性凝集消失聚凝胺交叉配血技术示意图1聚凝胺枸橼酸钠第40页,共62页，星期六，2024年，5月1红细胞上已有不完全抗体致敏2加入聚凝胺后，缩短红细胞之间的距离，让不完全抗体可以同时与两个红细胞结合使其特异性凝集3加入枸橼酸钠中和聚凝胺4由于不完全抗体的结合，红细胞的特异性凝集不消失聚凝胺交叉配血技术示意图2聚凝胺枸橼酸钠不完全抗体第41页,共62页，星期六，2024年，5月聚凝胺(Polybrene)配血方法患者献血者主侧次侧?室温放置1分钟主次侧均加聚凝胺第42页,共62页，星期六，2024年，5月聚凝胺(Polybrene)配血方法离心聚凝胺引起红细胞非特异性凝集阳性阴性主次侧均加重悬液看结果第43页,共62页，星期六，2024年，5月注意事项不能使用含枸橼酸钠和肝素抗凝标本按比例加样，非特异凝集60秒内观察结果出现不配合试验时，抗球蛋白重复，结果不一致时以抗球蛋白试验结果为准一般使用血清对Kell系统检测不理想按照说明书第44页,共62页，星期六，2024年，5月方法学评价盐水介质法：适用于ABO血型交叉配血，操作简单、快速，不能检出不相配合的IgG类抗体抗球蛋白试验：结果准确，检测不完全抗体最可靠的方法，操作繁琐费事，试