实验八动物细胞融合.pdfVIP

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实验八动物细胞融合

精选ppt

一、实验目的

Ø了解细胞融合的原理

Ø了解细胞融合的原理

Ø初步掌握聚乙二醇法诱导细胞融合的实验

Ø初步掌握聚乙二醇法诱导细胞融合的实验

方法。

方法。

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二、实验原理

细胞融合又称体细胞杂交是指在自然条

件或利用人工方法〔生物的、物理的,化学

的〕,使两个或两个以上的细胞合并成一个

具有双核或多核细胞的过程。利用人工诱导

方法,不仅可以使同种细胞发生融合,而且

可以使不同种间细胞发生融合。

精选ppt

n种内杂交细胞〔intraspecifichybridcell

n种内杂交细胞〔intraspecifichybridcell

〕:同种细胞融合而成的细胞

〕同种细胞融合而成的细胞

:

n种间杂交细胞〔interspecifichybridcell

n种间杂交细胞〔interspecifichybridcell

〕:不同种的细胞融合而成的细胞

〕不同种的细胞融合而成的细胞

:

精选ppt

人工诱导细胞融合

人工诱导细胞融合

病毒诱导融合

病毒诱导融合

化学诱导融合

化学诱导融合

电激诱导融合

电激诱导融合

精选ppt

1、病毒诱导融合

1、病毒诱导融合

n很多种类的病毒能介导细胞融合,如疱疹病毒、

n很多种类的病毒能介导细胞融合,如疱疹病毒、

牛痘病毒、新城鸡瘟病毒、仙台病毒等。

牛痘病毒、新城鸡瘟病毒、仙台病毒等。

n这类病毒的被膜中有融合蛋白〔fusion

n这类病毒的被膜中有融合蛋白〔fusion

protein〕,可介导病毒同宿主细胞融合,也

protein〕,可介导病毒同宿主细胞融合,也

可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线

可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线

灭活的此类病毒诱导细胞融合。

灭活的此类病毒诱导细胞融合。

n融合率较高,对各种动物细胞都适宜。但是病

n融合率较高,对各种动物细胞都适宜。但是病

毒不稳定,在保存过程中融合活性会降低,并

毒不稳定,在保存过程中融合活性会降低,并

且制备过程比较烦琐。此外,病毒引进细胞后,

且制备过程比较烦琐。此外,病毒引进细胞后,

可能会对细胞的生命活动产生干扰。

可能会对细胞的生命活动产生干扰。

精选ppt

2、化学诱导融合

2、化学诱导融合

n很多化学试剂能够诱导细胞融合,如聚

n很多化学试剂能够诱导细胞融合,如聚

乙二醇〔PEG〕、二甲亚砜、山梨醇、甘

乙二醇〔PEG〕、二甲亚砜、山梨醇、甘

油、溶血性卵磷脂、磷酸酰丝氨酸等。

油、溶血性卵磷脂、磷酸酰丝氨酸等。

n这类物质导致细胞膜脂分子排列的改变,

n这类物质导致细胞膜脂分子排列的改变,

在去除作用因素之后,质膜恢复原有的

在去除作用因素之后,质膜恢复原有的

有序结构,在恢复过程中由于接口处双

有序结构,在恢复过程中由于接口处双

分子层质膜的相互亲合和外表张力,使

分子层质膜的相互亲合和外表张力,使

相接触的细胞发生融合。

相接触的细胞发生融

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