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实验七聚合酶链式反响〔
PCR〕技术
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¡1.实验目的
¡2.实验原理
¡3.实验仪器、材料与试剂
¡4.实验步骤
¡5.实验结果与讨论
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实验目的
¡掌握PCR反响的原理及技术。
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实验原理
¡聚合酶链式反响〔polymerasechainreaction〕简称PCR技术,是一种体外扩增特异
DNA片段的技术。
¡利用PCR技术可在短时间内获得数百万个特异的DNA序列的拷贝。PCR
遗传病的基因诊断等方面得到广泛的应用。
¡PCR技术实际上是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶
的酶促合成反响。
¡PCR技术的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性。
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PCR:变性-退火-延伸
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PCR
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靶DNA的扩增
靶DNA的扩增
5’3’
5’3’
(a)
(a)
5’3’
引物25’3’
引物2
(b)
(b)3’5’
3’5’引物1
引物1
5’
5’3’
3’
引物2互补链引物1互补链
引物互补链引物互补链
(c)21
(c)
3’5’
3’5’
3’
3’5’
(d)5’
(d)
新引物
新引物
5’3’
5’
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