知识点+练习-微生物的实验室培养.docx

微生物的试验室培育(515考)

(2013新课标全国Ⅱ卷、四川理综、江苏卷，北京卷、浙江、山东，天津)

一、培育基

1概念：依据微生物对养分物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的养分基质

2．养分构成eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(?1?一般都含有水、、无机盐、碳源、氮源,?2?还需满意不同微生物对pH、特殊养分物质以及O2的要求))

3．培育基的种类及用处

划分

标准

培育基

的种类

特点

用处

物理性质

液体培育基

不加凝固剂

工业消费

半固体培育基

加凝固剂，如琼脂

视察微生物的运动、鉴定

固体培育基

微生物的分别与鉴定、活菌计数、菌种保藏

化学成分

自然培育基

成分不明确的自然物质

工业消费

合成培育基

培育基成清楚确

分类、鉴定

用处

选择培育基

培育基中参加某种化学物质，以抑制不须要的微生物的生长，促进所须要的微生物的生长

培育、分别出特定微生物(如在培育酵母菌与霉菌时，可在培育基中参加青霉素；在培育金黄色葡萄球菌时，可在培育基中参加高浓度的食盐等)

鉴别培育基

依据微生物的代谢特点，在培育基中参加某种指示剂或化学药品

鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培育基检测饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)

特殊提示自养微生物与异养微生物所需的养分物质不同：

①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物须要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可依据培育基中养分物质推断微生物的代谢类型。②含氮无机物不但能给自养微生物供给氮源，也能作为能源物质，供给能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。

二、无菌技术

1．消毒eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(特点：运用较为和顺的物理或化学方法仅杀死,物体外表或内部的局部微生物?不包括芽孢和孢子?,常用方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法))

2．灭菌eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(特点：指运用猛烈的理化因素杀死物体内外,全部微生物?包括芽孢和孢子?,常用方法：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌))

3．消毒与灭菌比拟

比拟

理化因素的作用强度

歼灭微生物的数量

芽孢与孢子能否被歼灭

消毒

较为温与

局部生活状态的微生物

不能

灭菌

猛烈

全部微生物

能

三、微生物的纯化培育及菌种的保藏

1原理:在培育基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。

2．制备固体培育基的流程eq\x(计算)―→eq\x(称量)―→eq\x(溶化)―→eq\x(灭菌)―→eq\x(倒平板)

3．纯化大肠杆菌的方法

常用的微生物接种方法有平板划线法与稀释涂布平板法。

平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培育基外表连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的外表。(如下图示)

(2)稀释涂布平板法：是将菌液进展一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的外表，进展培育。(如下图所示)

①系列稀释操作(如下图所示)②涂布平板操作(如下图所示)

(3)两种纯化细菌的方法的比拟

工程

优点

缺点

适用范围

平板划线法

可以视察菌落特征，对混合菌进展分别

不能计数

适用于好氧菌

稀释涂布平板法

可以计数，可以视察菌落特征

汲取量较少，较费事，平板不枯燥效果不好，简洁扩散

适用于厌氧菌与兼性厌氧菌

4.培育：接种后的培育皿放入恒温箱内培育

5．菌种保藏(1)临时保藏eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(操作：承受固体斜面培育基，菌落长成后，放入4℃冰箱中保藏，以后每3～6个月，,转移一次新的培育基,缺点：保存时间不长，菌种易被污染或,产生变异))

(2)长期保存法：甘油管藏法，放在－20_℃下保存

特殊提示(1)配制牛肉膏蛋白胨固体培育基的留意事项

①倒平板的相宜温度是50℃左右，温度过高会烫手，过低培育基又会凝固。

②平板需倒置，这样既可使培育基外表的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培育基，造成污染。

(2)平板划线操作的留意事项

①第一次划线及每次划线之前都须要灼烧接种环。

②灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。

③划线时最终一区不要与第一区相连。

④划线用力大小要适当，防止用力过大将培育基划破。

微生物培育与分别的考察

1．(·江苏)某探讨小组从有机废水中分别微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()。

A．培育基分装到培育皿后进展灭菌

B．转换划线角度后需灼烧接种环再进展划线

C．接种后的培育皿须放在光照培育箱中培育

D．培育过程中每隔一周视察一次

解析本题考察微生物的分别与培育过程中的操作要求与培育条件等相关学问，