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家兔冷冻精液生产技术规程
范围
本文件规定了家兔冷冻精液的精液采集、冷冻稀释液制备、制作过程、质量评定及包装、贮存和运输。
本文件适用于家兔的冷冻精液生产。
规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T5458液氮生物容器
NY/T3185家兔人工授精技术规程
术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
精液采集
采精技术
家兔精液采集方法应符合NY/T3185的规定。
新鲜精液质量要求
色泽呈乳白色或灰白色,精子活力应不小于80%,精子密度应不小于1.5×108个/mL。
冷冻稀释液制备
配置方法参照附录A,或购买商品冷冻稀释液。
制作过程
稀释方法
采集好兔精液,达到4.2要求后,应快速放入冰箱,在3℃~5℃冷藏90min。然后将等温等量的精液冷冻稀释液缓慢倒入精液中,宜边加边轻轻摇晃,使冷冻保存稀释液与兔精液充分混合。
分装和标识
用于分装精液的是微型细管,管内应留一定的空隙,两端封口应严密。细管外壁应清楚标明生产日期、生产站名、种兔品种和个体号。
平衡
应置于3℃~5℃平衡45min。
预冷冻
冷冻用具应洁净后消毒。平衡后的细管冻精立即转移至铜网或细管架上预冷冻,应在液氮液面上方5cm处预冷冻10min后浸入液氮保存。
生产记录
家兔冷冻精液生产记录表参照附表B.1。
质量评定
精液复苏
将细管冻精直接置于37°C水浴中解冻10s,适当摇动,使冻精融化。
质量要求
精液质量检测应具备显微镜,血球计数板,电子天平等常用仪器。家兔细管冷冻精液质量要求应符合表1的规定。
表1家兔细管冷冻精液质量要求
项目
指标
外观
细管无裂痕,两端封口严密,标志应清晰。
剂型,mL
微型,0.25
剂量,mL
0.20±0.01
精子活力,%
≥35
前进运动精子数,104个/剂
≥500
精子畸形率,%
≤20
菌落数,个/剂
≤600
判定规则
正常生产时,每三个月检验一次。每批随机抽取三份用于检验,结果以抽检三份样品的平均值为准。取样完成后应立即填写样品登记单。登记表参照附表B.2进行。对照表1要求,判定每批产品是否合格。
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