抗原抗体反应的应用.pdfVIP

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第三节抗原抗体反响的应用

一、免疫沉淀与免疫凝集

二、免疫标记

三、免疫定位分析

四、抗原抗体反映的其他应用

.

一、免疫沉淀与免疫凝集

1.溶液中的环状沉淀试验

n在体外可溶性抗原与相应抗体形成肉眼

看见的沉淀物。

n在液相中形成的沉淀不容易观察判断,

利用抗原和抗体溶液之间的界面形成的

沉淀线便于观察。

.

抗血清

沉淀线

抗原

对照1:101:201:401:801:160

抗血清稀释度

环状沉淀实验示意图

.

2.凝胶扩散沉淀

n抗原抗体在半透明的半固相介质中进行沉淀实验。

抗原分子与抗体分子在凝胶介质中自由扩散,相

遇形成沉淀。

n以琼脂扩散实验较为常用。

n单向免疫扩散:抗体混于琼脂中,小孔中参加抗

原,抗原向周围均匀扩散,与抗体形成沉淀环。

可用于定量测定免疫球蛋白和补体的含量等。

n双向免疫扩散:抗原和抗体向周围扩散后可在两

孔之间形成白色沉淀线,可用于抗原或抗体的定

性检测。

n缺点:时间长,灵敏度低。

.

单向免疫扩散:常用于测定IgG、IgM、

单向免疫扩散:常用于测定IgG、IgM、

IgA、C3、C4等。

IgA、C3、C4等。

抗体混于琼脂

凝胶中制板

沉淀环

沉淀环

环的直径与抗原

含量成正相关

.

n双向免疫扩散——沉淀线形状的变化显示抗原间是否

存在共同的抗原决定簇。

Ag1,3

Ab

Ab

Ab

.

3.电泳条件下的沉淀反响

1)血清免疫电泳:患者血清和正常人血清分别

放在凝胶上近负极端的小孔中进行电泳别

后,在两种抗原之间沿电泳方向挖一平行的

小槽,参加抗血清进行双扩散。

2)火箭电泳:单向免疫扩散与电泳结合的一种

方法。在电场作用下抗原向正极扩散,与抗

体形成沉淀峰〔火箭型沉淀线〕。需时短,

能检测微量抗原。

3)对流电泳(电渗析):在电场作用下抗原与抗

体相对扩散,形成沉淀线。对流电泳较双扩

快速和灵敏。

.

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