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第三节抗原抗体反响的应用
一、免疫沉淀与免疫凝集
二、免疫标记
三、免疫定位分析
四、抗原抗体反映的其他应用
.
一、免疫沉淀与免疫凝集
1.溶液中的环状沉淀试验
n在体外可溶性抗原与相应抗体形成肉眼
看见的沉淀物。
n在液相中形成的沉淀不容易观察判断,
利用抗原和抗体溶液之间的界面形成的
沉淀线便于观察。
.
抗血清
沉淀线
抗原
对照1:101:201:401:801:160
抗血清稀释度
环状沉淀实验示意图
.
2.凝胶扩散沉淀
n抗原抗体在半透明的半固相介质中进行沉淀实验。
抗原分子与抗体分子在凝胶介质中自由扩散,相
遇形成沉淀。
n以琼脂扩散实验较为常用。
n单向免疫扩散:抗体混于琼脂中,小孔中参加抗
原,抗原向周围均匀扩散,与抗体形成沉淀环。
可用于定量测定免疫球蛋白和补体的含量等。
n双向免疫扩散:抗原和抗体向周围扩散后可在两
孔之间形成白色沉淀线,可用于抗原或抗体的定
性检测。
n缺点:时间长,灵敏度低。
.
单向免疫扩散:常用于测定IgG、IgM、
单向免疫扩散:常用于测定IgG、IgM、
IgA、C3、C4等。
IgA、C3、C4等。
抗体混于琼脂
凝胶中制板
沉淀环
沉淀环
环的直径与抗原
含量成正相关
.
n双向免疫扩散——沉淀线形状的变化显示抗原间是否
存在共同的抗原决定簇。
Ag1,3
Ab
Ab
Ab
.
3.电泳条件下的沉淀反响
1)血清免疫电泳:患者血清和正常人血清分别
放在凝胶上近负极端的小孔中进行电泳别
后,在两种抗原之间沿电泳方向挖一平行的
小槽,参加抗血清进行双扩散。
2)火箭电泳:单向免疫扩散与电泳结合的一种
方法。在电场作用下抗原向正极扩散,与抗
体形成沉淀峰〔火箭型沉淀线〕。需时短,
能检测微量抗原。
3)对流电泳(电渗析):在电场作用下抗原与抗
体相对扩散,形成沉淀线。对流电泳较双扩
快速和灵敏。
.
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