细菌与噬菌体的遗传.ppt

**（2）三亲本重组体的出现三个不同的突变型噬菌体共同感染一个细菌，重组可以多次在三个噬菌体间发生。（3）重组体比例随宿主细胞破裂时间而改变E.Colix+y+z-x+y-z+x-y+z+X-y-z-第64页,共79页，星期六，2024年，5月**2、噬菌体的突变型（1）快速溶菌突变型裂解细菌细胞速度快，能形成大的四周清晰的噬菌斑的突变型。野生型r+噬菌斑小、中心清晰、四周模糊突变型r噬菌斑大、四周清晰（2）寄主范围突变型能侵入并裂解原来具有抗性的细菌细胞的突变。野生型h+能侵染E.Coli菌株B，不能侵染B/2菌株用h+侵染B和B/2的混合菌，形成半透明噬菌斑突变型h能侵染E.Coli菌株B，也能侵染B/2菌株用h+侵染B和B/2的混合菌，形成透明噬菌斑第65页,共79页，星期六，2024年，5月**(1)用两个不同的T2噬菌体共同侵染E.coliB菌株基因型h+r（半透明，大噬菌斑）基因型hr+（透明，小噬菌斑）（2）把释放出的子代噬菌体接种在培养有B和B/2的培养基上，可以看到四种不同的噬菌斑，统计不同的噬菌斑的数量。3、hr基因的重组第66页,共79页，星期六，2024年，5月**（3）计算重组值RF（h-r）=×100%重组型噬菌斑数量总噬菌斑数量三个基因间的三点测交自学(hr)+(h+r+)第67页,共79页，星期六，2024年，5月**1、噬菌体的条件致死突变型概念：条件致死突变(conditionallethalmutations)噬菌体大部分基因的功能是复制和产生子代噬菌体所必需的，这些基因的突变是致死的，不能形成噬菌斑，其中有些致死突变在限制条件下是致死的，而在许可条件下可形成噬菌斑，这种突变称为条件致死突变。２.5噬菌体基因的精细作图第68页,共79页，星期六，2024年，5月**表野生型与几种突变型的区别表现型不同大肠杆菌平板上噬菌斑表型BK(?)野生型小噬菌斑小噬菌斑rI大噬菌斑小噬菌斑rII大噬菌斑无噬菌斑（致死）rIII大噬菌斑小噬菌斑Benzer实验所用的T4的rⅡ突变就是一个条件致死突变型。第69页,共79页，星期六，2024年，5月**2Benzer的重组实验与精细作图：Benzer最初得到8个rII独立的突变型，将8种突变型两两组合感染E.coliB菌株（双重感染），从混合培养物中提取噬菌体颗粒感染E.coliK(λ)菌株。实验结果：E.coliK(λ)上出现野生型噬菌斑。第70页,共79页，星期六，2024年，5月**RF=×100%=×100%2×r+噬菌斑数2×K12（λ）上的噬菌斑数总噬菌斑数B上的噬菌斑数K12（λ）B第71页,共79页，星期六，2024年，5月**根据以上实验就可以构建多个rII突变型的线性图谱。由于噬菌体在大肠杆菌上的选择技术可以很精确，所以即使很低的重组频率都可以被检测到，可以检测到最低的的重组频率是0.02%（有的版本是0.01%），也就是说可以观察到的T4噬菌体的最小的重组距离是大约3个碱基。后来的研究发现重组可以发生在相邻的碱基之间，表明碱基对是突变和重组的最小单位。Benzer提出基因结构的顺反子、突变子（muton）、和重组子(recon)三个概念第72页,共79页，星期六，2024年，5月**对于两个独立起源的、表型相似的隐性突变，如何判定是属于同一基因(功能单位)还是两个基因突变产生的呢？在二倍体生物中，可以建立双突变杂合体。双突变体杂合体有两种形式：顺式(cis)和反式(trans)２.7互补测验（ComplementationTests）一、互补测验的原理和方法第73页,共79页，星期六，2024年，5月**根据两突变反式双杂合体的表现，就可以解决刚才的问题突变型?无互补作用?为同一功能单位的突变野生型?