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1.食品检验为什么要测定细菌菌落总数?

答:测定细菌菌落总数是检验食品纯度程度的指标，也是判断其保存能力的指标。

2.食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数?为什么？

答:不能代表该食品上所有细菌菌数。因为在实验过程中会造成细菌的损失或死亡，

食品上的细菌包括了各种各样的微生物。

3.为什么营养琼脂培养基在使用前要保持(46士1)℃的温度?

答：因为营养琼脂温度，若温度高于(46士1)℃容易将验样中的菌烫死；若温度低于

(46士1)℃则营养琼脂会凝固，影响培养效果。

4.大肠菌群检验中为什么首先要用乳糖胆盐发酵管?

答:因为乳糖胆盐发酵管中的成分有溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色。如

果颜色不变(量蓝紫色)，说明无产酸的大肠菌群；如果颜色变黄色，说明可能出现能

分解乳糖产酸的大肠菌群；胆盐可以抑制其它细菌生长繁殖；看杜氏小管中是否有气

体，判断是否为分解乳糖产酸产气的大肠自群。

5.做空白对照实验的目的?

答:目的是检验培养基是否受到污染，验证无菌操作。

6.为什么大肠菌群的检验要经过复发酵才能证实？

答:初发酵是样品的发酵结果，不是大肠菌群纯菌的发酵试验，有可能受其它杂菌影

响判断结果。进行证实实验避免假阳性结果。

7.复发酵为什么使用乳糖发酵管但不需加胆盐?

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答:胆盐能抑制革兰氏阳性菌等杂菌生长，在初发酵培养基已经加入胆盐抑制革兰氏

阳性菌生长，并在EMB培养基上进行分离培养，因此复发酵培养时无需乳糖发酵管，

以免大肠菌群受到抑制。

8.用油镜观察时应注意哪些问题?在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用?

答:应要擦掉油加香柏油，作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率。油的折

光率和分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比。

9.比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意

避免粗调节器的误操作？

答:使用高倍镜和油镜时镜头距高标本较近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器

的误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏和镜头。一般先用低倍镜找到

物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。

10.什么是物镜的同焦现象?它在显微镜观察中有什么意义?

答:在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后转动物镜转换器将其他物镜转

到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦的状态。这种现象称为物镜的同焦。利

用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时

仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损

坏镜头或载玻片。

11.影响显微镜分辨率的因素有那些?

答:物镜的NA值（物镜的数值孔径)与照明光源的波长。

12.应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效地观察？

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答:细菌用油镜，真菌用高倍镜。都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜太调到合

适的视野和合适的清晰度。

如：放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大40倍的物镜就可以看了；细菌小，

要用放大1000倍的物镜看，感觉还很小；病毒那就要用电子显微镜看了。

13.那些环节会影响革兰色染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么?

答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节，其中最关键的环节是脱色环节。

14.进行革兰氏染色时。为什么特别强调菌龄不能太老。用老龄细菌染色会出现什么问题?

答:着色不均，染色效果不好；阴性阳性不明显，分不太清楚，问题是不便于显微镜

下观察是阳性茵还是阴性菌。

15.革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴

性茵应分别是什么颜色?

答:不可以。因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁，

对实验结果造成影响。脱色后、复染前，革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色。

16.不经过复染这一步，能否区