红细胞酶缺乏症.ppt

[临床意义]①G-6-PD缺乏者荧光很弱或无荧光，出现荧光点的时间＞30分钟②在G6PD缺乏症高发人群中，对阵发性溶血而抗球蛋白试验和酸溶血试验阴性者，应考虑有本病的可能。网织红细胞增加可致假性G6PD活性增加。第31页,共45页，星期六，2024年，5月[评价]①本方法直接测定NADPH的量，有较强的特异性和敏感性，但仍需20%-30%的G6PD缺乏红细胞才能得出异常结果。②实验方法要求严格，试剂昂贵，需恒温分光光度计。第32页,共45页，星期六，2024年，5月③网织红细胞含有高浓度的G6PD，如患者最近发作过溶血，应将标本离心后取底层红细胞检测。④血红蛋白对荧光有淬灭作用，HCT50%时，应取标本的半量检测，20%时，取标本的两倍量做检测。第33页,共45页，星期六，2024年，5月丙酮酸激酶缺陷症第34页,共45页，星期六，2024年，5月?一、疾病概述红细胞丙酮酸激酶(pyruvatekinase,pk)缺乏症是一种常染色体隐性遗传性溶血性疾病。发病率仅次于G6PD缺陷症，但在我国少见。患者红细胞的丙酮酸激酶(PK)缺乏使ATP生成不足，导致细胞能量代谢障碍。最明显的是红细胞膜的离子通透性增加，细胞体积变小，成为皱缩、僵化红细胞，易于被脾或肝内巨噬细胞破坏而发生溶血。第35页,共45页，星期六，2024年，5月二、临床表现丙酮酸激酶缺乏症严重者可在婴儿早期即出现症状，为中度以上的贫血、黄疸，需反复多次输血才能存活。多数患者表现终身存在的慢性溶血性贫血，伴黄疸，部分患者会发生胆石症。极少数患者由于溶血被代偿而不表现贫血。新生儿的PKD常常发生高胆红素血症第36页,共45页，星期六，2024年，5月三、诊断方法[病史]?自幼发病，终身存在慢性溶血表现。[体格检查]贫血、黄疸的轻重常与病情的严重程度有关。可有脾肿大。第37页,共45页，星期六，2024年，5月诊断评析1．丙酮酸激酶缺乏症分为遗传性和继发性两种，本诊断标准主要用于遗传性丙酮酸激酶缺乏症。2．在临床如只有PK酶活性改变，无溶血表现者，则为红细胞PK缺乏。3.临床高度怀疑PK缺乏，而PK活性测定正常时，应进行底物系统的PK活性定量测定4．继发性的丙酮酸激酶缺乏症见于白血病、红白血病、再生障碍性贫血、难治性贫血及化疗后，常应有这些疾病的临床表现。第38页,共45页，星期六，2024年，5月实验室检查血常规检查?血红蛋白接近或低于正常值；网织红细胞计数增高；外周血涂片镜检可见大红细胞、皱缩红细胞或棘状红细胞。红细胞PK活性测定显示PK活性的降低荧光斑点法PK活性筛选试验呈中间缺乏或严重缺乏值。PK活性定量测定：正常值15．0土1．99u／gHb(37℃)。中间代谢产物(ATP、2，3DPG、PEP等)测定。第39页,共45页，星期六，2024年，5月二、丙酮酸激酶缺乏的检验方法丙酮酸激酶荧光斑点试验丙酮酸激酶活性检测第40页,共45页，星期六，2024年，5月[原理]在二磷酸腺苷（ADP）存在的条件下丙酮酸激酶（pyruvatekinase,PK）催化磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）转化成丙酮酸，在辅酶Ⅰ还原型（NADH）存在的情况下，丙酮酸被LDH转化为乳酸，若标记荧光于NADH上，此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD。在340nm波长下，检测NADH减少的速率，可定量推算PK活性。第41页,共45页，星期六，2024年，5月[参考值]正常人丙酮酸激酶活性荧光斑点在25min内消失，酶活性（15.0?1.99)U/gHb。第42页,共45页，星期六，2024年，5月[临床意义]①荧光斑点不消失或时间延长说明丙酮酸激酶活性缺乏，中间缺乏（杂合子）时，荧光在20∽60min内消失，纯合子60min不消失②杂合子PK缺乏症病人为正常人的25%∽50%，纯合子PK缺乏病的病人，为25%以下。第43页,共45页，星期六，2024年，5月③口服避孕药，代谢性肝病，急性白血病，再生障碍性贫血可致获得性PK的缺陷。[评价]红细胞PK活性测定是诊断丙酮酸激酶缺乏症直接和可靠的证据，但检查方法比较复杂。HbRet同G6PD。第44页,共45页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第45页,共45页，星期六，2024年，5月关于红细胞酶缺乏症第一节概述红细胞代谢葡萄糖代谢铁代谢红细胞核苷酸代谢第2页,共45页，星期六，2024年，5月红细胞要有效维持其正常生理功能，必须保证一定的能量代谢，红细胞能量代谢的主要作用：