DB34T 4315-2022 甜叶菊组培快繁技术规程.docxVIP

ICS65.020.20CCSB34

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安徽省地方标准DB34/T4315—2022

甜叶菊组培快繁技术规程

TechnicalregulationsfortissuecultureandrapidpropagationofSteviarebaudiana

2022-10-26发布2022-11-26实施

安徽省市场监督管理局发布

I

DB34/T4315—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由阜阳师范大学提出。

本文件由安徽省农业农村厅归口。

本文件起草单位：阜阳师范大学、界首市佳祺农业开发有限公司、淮北泽优农业发展有限公司、安徽田园居电子商务股份有限公司、安徽省功能性果饮生态发酵工程研究中心、中国科学院亚热带农业生态研究所、安徽稷神农业科技有限公司、阜阳市颍州区农业广播电视学校、阜南县公桥乡农业综合服务站、淮北市相山区农业农村水利局、安徽农之源生态农业有限公司。

本文件主要起草人：兰伟、徐高骁、胡新、孔祥峰、纵玉华、胡仲华、刘旭、杜天志、杨光硕、李瑞龙、陈颖、于涛、徐灵杰、张顺。

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DB34/T4315—2022

甜叶菊组培快繁技术规程

1范围

本文件规定了甜叶菊[Steviarebaudiana（Bertoni）Hemsl.]组培快繁的组培设施、培养基配制、灭菌、无菌苗初代培养、继代增殖培养、生根培养、炼苗、组培苗清洗和移栽、档案管理。

本文件适用于甜叶菊组培苗工厂化生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

JB/T10594日光温室和塑料大棚结构与性能要求LY/T2289林木种苗生产经营档案

NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4组培设施

洗涤室

4.1.1应宽敞明亮、通风良好、水电配套、排水畅通。墙面和地面应便于清洁，地面要做防滑处理。

4.1.2配置洗瓶机、烘箱、小推车等。

准备室

4.2.1应空间宽敞、清洁明亮、通风良好、墙壁光滑、地面平坦。设有工作台和水池。

4.2.2配置高压蒸汽灭菌锅、微波炉、托盘、水浴锅、蒸馏水器、冰箱、培养箱、电子分析天平、电子天平、电热磁搅拌器、酸度计、培养基自动定量灌装机等。

接种室

4.3.1应干爽安静、清洁明亮，墙壁光滑平整，地面平坦无缝。

4.3.2配置超净工作台、双筒实体显微镜、空调、紫外灯、空气净化装置、组培灭菌器、镊子、剪刀

等。

培养室

4.4.1应温度可控，光照强度和光照时间可控，湿度可控，相对密闭。

4.4.2配置紫外灯、空气净化装置、空调、程控定时器、温度计、湿度计、光照培养箱等。

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DB34/T4315—2022

4.5温室

温室建造按JB/T10594的规定执行。可选择玻璃温室或薄膜温室，温度可控范围15℃~32℃,可以喷水补湿，并且具有良好的防虫隔离条件。

5培养基配制

5.1培养基类型

5.1.1基本培养基

MS培养基为基本培养基，成分见附录A。

5.1.2初代培养基

MS+6-BA(6-苄氨基嘌呤)1.0mg/L～1.5mg/L+NAA(萘乙酸)0.1mg/L～0.2mg/L+白砂糖30g/L+卡拉胶5.5g/L。

5.1.3继代增殖培养基

MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L～0.2mg/L+白砂糖30g/L+卡拉胶5.5g/L。

5.1.4生根培养基

1/2MS+IBA0.1mg/L～0.5mg/L+白砂糖20g/L+琼脂粉5.0g/L。

5.2培养基配制

5.2.1按NY/T2306的规定执行。

5.2.2用1.0mol/LNaOH或HCl调节培养基pH值至5.8。

5.2.3每瓶分装培养基厚度0.8cm～1.0cm。

6灭菌

6.1培养基灭菌

培养基应于12h内置于高压灭菌锅内，在1.1kg/cm2、121℃条件下，灭菌15min～20min,待压力降至0时，尽快取出存放在接