免疫学技术在科研中的应.pdfVIP

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免疫新技术在科研中的应用

相关帮助

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抗原或抗体的检测

w抗原抗体反响的特点

w抗原抗体反响的影响因素

w常用的抗原抗体反响

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抗原抗体反响的特点

w高度的特异性

w可逆性

w抗原抗体结合除了空间构象互补外,主要

以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等

分子外表的化学基团之间的非共价方式结

合。这种非共价键不如共价键结合稳定,

极易受温度、酸碱度和离子强度的影响而

解离。

w抗原抗体比例影响免疫复合物的大小

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抗原抗体反响的影响因素

w抗原抗体浓度与比例

w电解质

w抗原抗体特异性结合后,亲水性降低,易受

解质的影响而使外表失去较多的负电荷。

w温度

w适当的温度可增加抗原与抗体分子的碰撞时机,

加速抗原抗体复合物的形成。

w酸碱度

w抗原抗体反响的最适pH在6—8之间,pH过高

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或过低,即过碱或过酸,均可影响抗原、抗体

常用的抗原抗体反响

w凝集反响

w沉淀反响

w免疫标记技术

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凝集反响

w直接凝集反响

w血型鉴定

w肥大反响

w间接凝集反响

w间接凝集抑制试验

w微粒捕获酶免疫分析技术

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间接凝集反响

w将可溶性抗原或抗体吸附在与免疫无关

的颗粒载体上,形成致敏颗粒,再与相

应抗体或抗原进行反响产生的凝集反响,

称为间接凝集反响。

w颗粒载体有红细胞、聚苯乙烯乳胶颗粒、

活性炭颗粒,而相应的凝集现象分别称

为间接血球凝集、间接乳胶凝集、间接

炭粒凝集反响。

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微粒捕获酶免疫分析技术

w将特异性抗体致敏的免疫微粒与生物素

—亲和素—酶放大系统相结合,最后酶

作用于荧光底物,使之发荧光,通过检

测荧光强度判断待测抗原的含量。

w检测肿瘤标记物CAl99、CEA、CAl25、

AFP、性激素、甲状腺素T-T+、叶酸、

HIV抗体、HCG等微量可溶性抗原。

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沉淀反响

w速率散射比浊法/免疫比浊法

w琼脂扩散法

•单向琼脂扩散

•双向琼脂扩散

•火箭电泳

•对流免疫电泳

•免疫印迹技术

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速率散射比浊法/免疫比浊法

w将抗体与相应抗原在液相中按一定比例混合形成可溶

性免疫复合物,这些复合物微小粒子对一定波长的光

照射发生散射,可通过三个光路系统测定光散射(OD值

)。

w抗体含量固定并处于抗体过剩时,免疫复合物的多少

直接取决于抗原的浓度,抗原的终浓度通过标准品绘

出的标准曲线查出。

w提高了

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