食品安全国家标准 菌落总数测定 .pdfVIP

食品安全国家标准

食品微生物学检验菌落总数测定

1范围

本标准本标准规定了食品中菌落总数（Aerobicplatecount）的测定方法。

本标准适用于食品中菌落总数的测定。

2术语和定义

2.1菌落总数aerobicplatecount

食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）

检样中形成的微生物菌落总数。

3设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

3.1恒温培养箱：36℃±1℃，30℃±1℃。

3.2冰箱：2℃～5℃。

3.3恒温水浴箱：46℃±1℃。

3.4天平：感量为0.1g。

3.5均质器。

3.6振荡器。

3.7无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。

3.8无菌锥形瓶：容量250mL、500mL。

3.9无菌培养皿：直径90mm。

3.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。

3.11放大镜或/和菌落计数器。

4培养基和试剂

4.1平板计数琼脂培养基：见附录A中A.1。

4.2磷酸盐缓冲液：见附录A中A.2。

4.3无菌生理盐水：见附录A中A.3。

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5检验程序

菌落总数的检验程序见图1。

检样

25g（或25mL）样品+225mLBPW，均质

10倍系列稀释

选择适宜2~3个连续稀释度的样品匀液，

各取1mL分别加入无菌培养皿内

每皿中加入15mL~20mL

平板计数琼脂培养基，混匀

36℃±１℃24h±2h

计数各平板菌落数

计算菌落总数

报告

图1菌落总数检验程序

6操作步骤

6.1样品的稀释

6.1.1固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯

内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍

击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。

6.1.2液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥

形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。

6.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释

液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打

使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。

6.1.4按6.1.3操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌

吸管或吸头。

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6.1.5根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原

液），在进行10倍递增稀释时，吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，

分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。

6.1.6及时将15mL～20