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1.2基因工程的根本操作程序
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基因工程根本操作的四个步骤
1、目的基因的获取
2、基因表达载体的构建
3、将目的基因导入受体细胞
4、目的基因的检测与鉴定
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一、目的基因的获取
请阅读P9第一和二两段
编码蛋白质的结构基因
(一)、目的基因主要是______________________
请举出三个以上的例子
〔二〕、获取目的基因的常用方法有哪些?
1、从基因文库中获取
2、利用PCR技术扩增
3、人工合成
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一、目的基因的获取
〔一〕从基因文库中直接获取
基因组DNA
限制酶
1.基因文库
1)基因组文库(Genomiclibrary)
基因重组
是指将某种生物体的全部基因组
DNA用限制性内切酶或机械力量
切割成一定长度范围的DNA片段，
再与适宜的载体在体外重组后，
体外包装
导入受体菌的群体中储存，这个
群体就称为该生物基因组文库。
其目的是别离有用的目的基因和
转化细菌
保存某种生物的全部基因。
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一、目的基因的获取
〔一〕从基因文库中直接获取mRNA
1.基因文库
2)cDNA文库(cDNAlibrary)反转录酶
cDNA
cDNA(互补DNA)：
是由生物的某一特定器官或
基因重组
特定发育时期细胞内的mRNA
经体外反转录后形成的互补
DNA片段，与载体连接后储
存在一个受体菌群中，这个
受体菌群就叫做这种生物的
cDNA文库
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一、目的基因的获取
〔一〕从基因文库中直接获取
①基因文库的分类
按照外源DNA片段的来源：
从特定组织提取的染色体基因组DNA
基因组DNA文库〔总〕
mRNA反转录成的cDNA拷贝cDNA文库〔局部〕
②基因文库的目的
为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。
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一、目的基因的获取
〔一〕从基因文库中直接获取
2.基因文库的构建方法
①：直接别离法(鸟枪法)多用于原核生物
供体细胞中的DNA
限
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