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饲料中真蛋白的测定及其意义

饲料是畜牧养殖生产中的重要生产资料，饲料中蛋白质含量是判定饲料营养价值的一

项重要指标，饲料中粗蛋白质包括真蛋白质和非蛋白质两部分含氮物质，后者主要包括游离

氨基酸、硝酸盐、氨等，故不能反映出饲料蛋白质对动物的真正营养价值。目前，部分养殖

场户存在一个认识误区，认为标签上标注的粗蛋白质高，营养价值就高。为此，部分饲料生

产企业利用人们认识上的误区，在饲料生产中添加羽毛粉、血粉、尿素等不易被动物肌体吸

收的物质，饲料产品中粗蛋白含量上去了，但却没有相应的营养价值，造成养殖效益的低下。

真蛋白的检测方法

1适用范围

本操作方法适用配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。

2原理

样品在水溶液中，加入过量硫酸铜，在碱性条件下，纯蛋白被氢氧化铜沉淀，用水洗去

水溶性含氮物，沉淀部分按粗蛋白的测定方法测定其含氮量。

3试剂

3.110%硫酸铜溶液：

称取五水硫酸铜10g用水溶解，转移至100ml容量瓶中定容至刻度。

3.22.5%氢氧化钠溶液：

称取2.5g氢氧化钠用水溶解，转移至100ml容量瓶中定容至刻度。

3.3硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。

3.4催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水，6g硫酸钠，均为化学纯，磨碎混匀。

3.5氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（M/V）。

3.5.1配制方法：

500g氢氧化钠+1100ml蒸馏水。

3.6硼酸：化学纯，2%水溶液（M/V）。

3.6.1配制方法：

20.5g硼酸+1000ml蒸馏水。

3.7混合指示剂：

甲基红，1%乙醇溶液，溴甲酚绿，0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存

期为三个月。

3.7.1溴甲酚绿，0.5%乙醇溶液配置：

溴甲酚绿0.125g+25ml乙醇。

3.7.2甲基红，1%乙醇溶液配置：

甲基红0.025g+25ml乙醇。

3.8盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB/T601制备。

3.8.10.02mol/L盐酸标准溶液：1.67ml盐酸，分析纯，注入1000ml蒸馏水中。

3.8.20.1mol/L盐酸标准溶液：8.3ml盐酸，分析纯，注入1000ml蒸馏水中。

3.9硫酸铵：分析纯，干燥。

3.10蔗糖：分析纯。

4仪器设备

4.1实验室用样品粉碎机。

4.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。

4.3分析天平：感量0.0001g。

4.4电炉。

4.5滴定管：酸式，25、50ml。

4.6凯氏烧瓶：250ml。

4.7凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏式。

4.8锥形瓶：250ml。

4.9容量瓶：100ml。

4.10烧杯：200ml。

4.11干燥箱。

5分析步骤

5.1半微量法

5.1.1样品的处理

称取待测样品0.5-1g（精确到0.1mg）于200ml（4.10）烧杯中，加入50ml蒸馏水，用

玻璃棒搅拌均匀，在电炉（4.4）上加热煮沸，加入20ml10%硫酸铜溶液（3.1），再加入20ml

2.5%氢氧化钠溶液（3.2）搅匀，从电炉上取下，在室温放置2h，然后用倾泻法将样品过滤

到滤纸上，用少量温水多次洗涤烧杯和沉淀物，直至洗出液无硫酸根离子（用10%氯化钡溶

液来检验滤液无沉淀），连同漏斗一起放入80℃干燥箱（4.11）中烘干，将滤纸和沉淀物小

心放入250ml凯氏烧瓶（4.6）中，加入6.4g催化剂（3.4），20ml浓硫酸（3.3），在电炉（4.4）

上消化，样液澄清后继续消煮2h，取下冷却后加入20ml蒸馏水，转入100ml容量瓶（4.9）

中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，做为试样分解液。同时做空白实验。

5.1.2蒸馏

将半微量蒸馏装置（4.7）的冷凝管末端浸入装有20ml硼酸（3.6）的吸收液和2滴混

合指示剂（3.7）的锥形瓶（4.8）内。蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数

滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需