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碱变性法提质粒的基本原理和主要步骤:郑老师

其主要原理是，利用与质粒的变性与复性的差异而达到分离目的。在碱变

性条件下（pH12.6），的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性，质粒氢键也

大部分断裂，双螺旋也有部分解开，但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离，当以

pH4.8的乙酸钠将其pH调到中性时，变性的质粒又恢复到原来的构型，而

不能复性，形成缠绕的致密网状结构，离心后，由于浮力密度不同，与大分子

RNA、蛋白质SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。

分离质粒的方法一般包括3个基本步骤：培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细菌；分

离和纯化质粒。

透射电镜样品基本步骤茹老师

1）取材：“快、准、轻、小”为原则。“快”即取材迅速，使标本在离体0.5-2分

钟内浸入固定液，使受检标本最度在生活状态下固定，保存超微结构原貌；

“准”即准确可靠进行定位和定向；“轻”即避免对组织挤压和钳拉，减少人工损伤

性变化；“小”即电镜标本固定液力比较弱，以1㎡为宜。

2）前固定：以醛类固定液固定标本4小时以上，使细胞生命活动立即停止，使

精细结构得以良好保存。

3）后固定：以锇酸后固定标本2小时内完成。

4）脱水：或乙醇系列脱水，每级5-15分钟。

5）：环氧丙烷15-30分钟，包埋剂2小时。

6）包埋：包埋剂包埋，60℃条件下36小时聚合。

7）切片：以超薄切片机切成500nm厚的切片（50A）。

8）电子染色：醋酸铀染色30-45分钟，柠檬酸铅复染30分

钟。观察。

细胞间通讯载体三个条件

1.以方式释放

2.特异的受体偶联细胞内的信号传导

3.快速清除以终止功能

TherapeuticIndex

治疗指数

通常将半数致死量（LD50）／半数有效量（ED50）的比值称为治疗指数，用以表

示药物的安全性。

治疗指数大的药物相对治疗指数小的药物安全。但以治疗指数来评价药物的安全

性，并不完全可靠。为此有人用1%致死量（LD10）与99%有效量（ED99）的比

值或5%致死量（LD5）与95%有效量（ED95）之间的距离来衡量药物的安全性。

简答题：

目前已获FDA批准用于治疗NHL的抗体类药物有哪几种？各有何特点？

1.Rituximab美罗华利妥昔单抗

其结构包括能特异性结合B细胞的小鼠可变区与人抗体FC段和K段恒定区相

结合的嵌合抗体。Rituximab主要作用机制为通过抗体依赖的细胞毒作用（ADCC）

和补体介导的作用（CDC），以及诱导细胞凋亡能特异性地清除B淋巴细

胞主要用于治疗CD20阳性的低度恶性的B细胞性NHL，也可用于部分中、

高度恶性NHL

2.Campath-1H(Alemtuzumab)阿仑单抗

人源化IgGIk单抗，靶抗原是CD52。CD52在正常和恶性的B、T以及NK单核

和巨噬细胞表面均有表达。CAMPATH-1H能激活补体、介导抗体依赖细胞毒作用，

并能在某些细胞株中诱导细胞凋亡

3Zevalin(ibritumomabrituxetan)替伊莫单抗，主要特点：第一个性标记的单

克隆抗体，用于难治复发、低度恶性或者滤泡性NHL的治疗，或者初治的滤泡性

NHL。由性同位素钇90和CD20单抗组成，钇90纯β射线，具有更强

的射线能量，并且专门B细胞表面的CD20蛋白