动物克隆新版.pptx

第三节动物的克隆

动物克隆的技术基础是：动物的细胞和组织培养

一、动物细胞培养和克隆形成（一）动物细胞、组织培养1.动物细胞培养从动物体取出一部分组织机械消化或胰酶消化分散成单个细胞一定条件下培养细胞生存、生长、分裂、衰老、死亡；保持接触克制胰酶处理细胞培养

大多数组织细胞不适应悬浮生长，它们必须在固定的表面上生长和分裂。细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞越来越多，当贴壁生长的细胞分裂生长到表面互相接触时就停止分裂增加，这种现象叫做接触克制。需要定时用胰蛋白质酶使细胞从壁上脱下来。

一、动物细胞培养和克隆形成（一）动物细胞、组织培养2.动物组织培养动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。

一、动物细胞培养和克隆形成（一）动物细胞、组织培养2.动物组织培养（广义）多个生物体构造成分的体外培养。细胞培养组织培养器官培养器官在体外和人工控制的条件下得以保存生长。

一、动物细胞培养和克隆形成（二）动物组织培养技术的发展1.1885年，鸡神经板在生理盐水中培养成活。2.1903年，将皮肤及白细胞培养于腹水及血清中，细胞存活达一种月，且观察到细胞分裂3.1907年，将蛙胚神经管培养在蛙淋巴液中，成功看到神经末端的阿米巴运动。4.1912年，对鸡胚心脏组织块进行培养。5.1943年，获得长久培养细胞系。“组织培养”一词产生真正的组织培养开始；创立了悬浮培养法成功进行了传代培养；发明了卡氏瓶；研制了人工培养液大量细胞系的建成标志着组织培养工作进入了全新阶段

三动物细胞培养的条件

1、无菌、无毒的环境2、营养（葡萄糖、氨基酸、生长因子、无机盐、微量元素、血清等）3、温度和PH值（温度为360C~370C,PH为7.2－7.4）4、气体环境（O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的重要作用是维持培养液的PH值）二氧化碳培养箱中培养

原代培养传代培养从机体取出后立刻进行的细胞、组织培养原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长，增殖。…………

一、动物细胞培养和克隆形成（三）细胞系、细胞株原代培养传代培养…………原代培养物细胞系原代培养物在初次传代时就成为细胞系可连续培养的持续细胞系不能连续培养的有限细胞系

一、动物细胞培养和克隆形成（三）细胞系、细胞株细胞株：通过一定的选择或纯化办法，从原代培养物或细胞系中获得的含有特殊性质的细胞，称为细胞株。细胞株普通含有恒定的染色体组型、同工酶类型、病毒敏感性和生化特性等。连续细胞株有限细胞株细胞系：泛指能够传代的细胞；细胞株:含有特殊性质的细胞系

一、动物细胞培养和克隆形成（四）克隆培养法把一种单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一种新的细胞群体的技术。2.技术规定：确保分离出来的细胞是一种。1.克隆培养法/细胞克隆：特点:后裔细胞群遗传性状均一,体现的性状相似

一、动物细胞培养和克隆形成（四）克隆培养法3.适合于克隆的细胞：无限细胞系、转化细胞系、肿瘤细胞等。4.提高细胞克隆形成率的方法：选择适宜的培养基；添加血清；以滋养细胞支持生长；激素刺激；使用二氧化碳培养箱调节PH。

一、动物细胞培养和克隆形成（四）克隆培养法5.细胞克隆的重要用途：从普通细胞系中分离出缺少特殊基因的突变细胞系。例如研究缺少某种特殊蛋白的细胞，能够发现正常细胞中这种蛋白的功效。

思考：1、动物细胞培养液的重要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？植物细胞培养基：在人工合成的培养基中，包含植物生长和发育所需要的全部营养成分，涉及矿质元素（分为大量元素、微量元素）、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加剂动物细胞培养液：动物细胞培养液普通含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。与植物细胞培养基相比，动物细胞培养液的独特之处：（1）液体培养基（2）其成分中有动物血清、葡萄糖

2、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最后培养成新个体？不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体

植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的

植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的

植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质液体、半固体、固体培养基液体培养基培养基特有成分培养结果培养目的

植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质液体、半固体、固体培养基液体培养基培