2023年版中国药典通则1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法.pptxVIP

2023年版中国药典通则1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法本部分介绍中国药典通则1105中关于非无菌产品微生物限度检查的微生物计数法。该方法用于确定产品中微生物的总数，并通过计数结果评估产品的微生物质量。hdbyhd

非无菌产品微生物限度检查的重要性确保产品安全微生物污染可能导致产品失效或造成消费者健康问题，因此严格控制微生物限度至关重要。保障患者权益微生物限度超标的药品可能对患者健康造成危害，因此需严格控制微生物限度，保障患者使用安全。维护企业信誉严格执行微生物限度检查能够有效提升企业产品质量，维护企业信誉，增强消费者信心。

适用范围药典通则1105的适用范围本通则适用于非无菌制剂的微生物限度检查，包括口服、外用、注射用等各种非无菌制剂。本通则不适用于生物制品、疫苗、血液制品等特殊制剂。药品类别片剂胶囊剂粉剂颗粒剂注射剂栓剂膏剂乳膏剂

检查原则11.代表性抽取的样品应能代表整个批次的质量。22.准确性微生物计数方法应准确可靠，确保结果的真实性。33.可重复性同一批样品，不同时间、不同人员进行检测，结果应一致。44.标准化严格按照中国药典通则1105进行操作，确保检测结果的准确性和可比性。

检查方法非无菌产品微生物限度检查主要采用培养法，包括平板培养法和滤膜法。1样品制备按照药典要求进行样品处理，制备成适当浓度的样品溶液。2接种培养将样品溶液接种到培养基上，并进行适宜温度下的培养。3菌落计数培养结束后，对培养基上的菌落进行计数，并根据计数结果进行判断。

菌群鉴定形态学观察显微镜观察细菌形态，如球菌、杆菌、螺旋菌等。生理生化试验利用细菌的生理生化特性进行鉴定，如糖发酵试验、氧化酶试验等。分子生物学方法如16SrRNA基因测序，可以更精确地鉴定细菌种类。

无菌操作技巧手部消毒操作前，用肥皂和水彻底清洁双手，并用酒精或碘伏消毒。无菌操作台选择洁净度高的无菌操作台，并保持操作台的清洁和干燥。器材消毒所有用到的器材都需进行高压灭菌，并用无菌水冲洗。火焰灭菌在操作过程中，经常使用火焰灭菌，保持器材的无菌状态。

培养条件培养温度细菌培养温度通常为30-37℃，真菌培养温度通常为20-25℃。需严格控制培养温度，确保培养基温度稳定，并避免温度波动。培养时间细菌培养时间一般为24-48小时，真菌培养时间一般为4-7天。应根据不同微生物的生长特性和培养条件进行适当调整，并记录培养时间。培养环境培养环境应清洁、干燥、通风良好。避免阳光直射和高温潮湿环境，同时注意培养环境的消毒灭菌。

平板培养操作步骤步骤一：制备培养基选择合适的培养基，按照说明书进行制备，灭菌后冷却至45℃左右。步骤二：接种样品使用无菌操作方法，将待检样品稀释液准确接种于培养基平板表面。步骤三：培养将接种好的平板置于30-35℃培养箱中，培养2-7天，并观察菌落生长情况。步骤四：计数菌落培养结束后，统计平板上的菌落数，并根据稀释倍数计算出样品中的微生物总数。

集菌膜培养操作步骤1步骤一：样品处理取样品适量，用无菌生理盐水或其他适宜溶液稀释至适当浓度，确保样品能够均匀分布于滤膜上。2步骤二：过滤将稀释后的样品通过集菌膜过滤器，使微生物被截留在滤膜上，并用无菌生理盐水冲洗过滤器，确保样品完全被转移到滤膜上。3步骤三：培养将滤膜转移到相应的培养基上，并置于适宜的温度和湿度下培养，观察微生物生长情况。

计数方法菌落计数器自动计数器可提高效率，但需定期校准以确保准确性。显微镜计数适用于难以计数的菌落，如霉菌或酵母菌。计算公式根据培养基稀释倍数和培养皿中菌落数计算细菌总数。

细菌总数限度要求细菌总数限度要求根据产品类别而有所不同，一般原料药的细菌总数限度较高，制剂的细菌总数限度较低，注射剂的细菌总数限度最低。

真菌总数限度要求中国药典规定，非无菌产品中的真菌总数限度应根据产品的类别和用途进行设定。例如，口服制剂的真菌总数限度一般不超过100CFU/g或100CFU/mL，而注射用制剂的限度则更严格，通常不超过10CFU/g或10CFU/mL。

关键控制点11.培养基制备培养基的质量直接影响检测结果，因此要严格控制培养基的质量。22.采样采样过程要严格遵循相关规范，确保样品代表性，避免污染。33.培养条件培养温度、时间等条件需严格控制，以保证微生物的生长繁殖。44.计数方法计数方法需准确，并使用合适的计数标准，确保结果准确可靠。

结果计算与判定1计数结果根据培养结果计算菌落数2限度要求参考药典规定的限度3判定结果根据计数结果和限度判定合格与否判定结果需明确记录，作为产品质量控制的重要依据。

检查报告要求结果记录检查结果应详细记录，包括测试方法、样品信息、培养条件、菌落计数等信息。报告内容检查报告需包含样品名称、批号、测试日期、结果判定、结论等内容。格式规范检查报告