2025年新人教版高考生物一轮复习 第十单元　专题突破10　综合PCR的基因工程问题.pdfVIP

2025年新人教版高考生物一轮复习

一、选择题：每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求。

1．利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单

链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是()

A．用PCR方法扩增目的基因时不需知道基因的全部序列

B．设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连

C．复性温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物

D．第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16

2.PCR引物的3′端为结合模板DNA的关键碱基，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切

点等序列。下列叙述正确的是()

A．PCR第5个循环，消耗了16对引物

B．脱氧核苷酸作为扩增的原料，会依次连接到引物的5′端

2＋

C．PCR反应体系中需要加入脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、Ca等

D．用图中引物扩增至少4个循环后才能获得两端均添加限制酶切点的目的产物

3．(2024·威海高三模拟)重叠延伸PCR可实现定点基因诱变，其操作过程如图所示(凸起处代

表突变位点)。下列说法正确的是()

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A．过程①需要把两对引物同时加入一个扩增体系以提高扩增效率

B．过程①需要2轮PCR才能得到图中所示PCR产物

C．过程②的产物都可以完成延伸过程

D．若过程④得到16个突变基因则需要消耗15个通用引物RP2

4．反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列(图中L、R)进行扩增的技术，其过程

如图所示。下列相关叙述不正确的是()

A．过程①用同一种限制酶对未知序列两端进行切割

B．过程②需要使用DNA连接酶，形成磷酸二酯键

C．过程③PCR体系需要添加耐高温的DNA聚合酶和解旋酶

D．该技术可检测T－DNA整合到植物染色体DNA的位置

5．(2024·泰州高三联考)IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免

疫缺陷(SCID)患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C。为研究该患儿发病机制，

研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因，如图所示。下列说法错误的是()

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A．PCR中使用的引物有引物A、引物C

1

B．PCR中使用的引物有引物B、大引物b链

2

C．PCR过程需要扩增3轮才能获得目标产物

1

D．PCR过程中，为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度

2

6.(2024·苏州高三调研)荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，用于病毒检测。其

原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针。当耐高温的

DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增

一次，就有一个荧光分子生成(如图)。通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值(荧光信号达到

设定阈值时所经历的循环次数)。下列相关叙述错误的是()

A．PCR每个循环包括变性、复性(引物和模板结合)、延伸3个阶段

B．耐高温的DNA聚合酶在该反应中的作用是形成磷酸二酯键

C．最终监测的荧光强度与起始时反应管内样本DNA的含量呈正相关

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D．Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高

二、选择题：每小题给出的四个选项中有一个或多个符合题目要求。

7．(2024·衡阳高三质检)研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒(图

中标注了相关限制酶切割位点)，将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。下列叙

述正确的是()

A．构建重组质粒的过程应选用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶

B．使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组

C．能在添加四环素的培养基上生存一定是含有重组质粒的大肠杆菌

D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙

8．(2024·南通高三调研