2025年新人教版高考生物一轮复习 第十单元　课时练61　基因工程的基本工具和基本操作程序.pdfVIP

2025年新人教版高考生物一轮复习

一、选择题：每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求。

1．(2024·长沙高三调研)基因工程中需使用多种工具酶，几种限制酶的切割位点如图所示。下

列说法正确的是()

A．限制酶SmaⅠ和EcoRV切割形成的末端，可以通过E.coliDNA连接酶相互连接

B．DNA连接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯键的形成

C．限制酶EcoRⅠ进行一次切割，会切断2个磷酸二酯键，形成1个游离的5′末端

D．若两种限制酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶相互连接

2．(2023·新课标，6)某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目

的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达

载体。限制酶的切割位点如图所示。

下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()

A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coliDNA连接酶连接

B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA连接酶连接

C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4DNA连接酶连接

D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coliDNA连接酶连接

3．(2024·泰州高三质检)RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结

合的技术，可利用此技术获取目的基因，具体过程如图所示。下列说法不正确的是()

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A．设计扩增目的基因的引物时需考虑目的基因两端的碱基序列

B．G/C含量高的引物在与模板链结合时，复性的温度较高

C．该技术用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度

D．过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、TaqDNA聚合酶和引物A等

4．(2024·青岛高三二模)转基因植物中标记基因的剔除可有效防止基因污染，剔除常用分离剔

除法和重组剔除法。分离剔除法是在转基因时将目的基因和标记基因分别构建在两个Ti质粒

上，通过共转化得到转基因植物后让其自交得到不含标记基因的转基因个体；重组剔除法利

用Cre/LoxP重组酶系统，Cre酶能有效剔除重组载体中含有标记基因的序列，只留下一个LoxP

位点，具体原理如图。下列说法不正确的是()

A．利用分离剔除法时，目的基因和标记基因都应插到Ti质粒的T－DNA序列内部

B．分离剔除时目的基因和标记基因插到植物细胞的同源染色体或非同源染色体上均可成功

C．上述重组载体中启动子1在农杆菌中可发挥作用，而在植物细胞中不能发挥作用

D．经重组剔除后的标记基因，因没有启动子而无法启动基因的转录

5．(2024·聊城高三联考)如图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能

在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残

留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述正确的

是()

A．过程①中除草剂抗性基因插入T－DNA中，导致T－DNA片段失活

B．过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化

2＋

C．过程②用Ca处理，使农杆菌细胞壁通透性改变，使其处于能吸收周围环境中DNA分

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子的生理状态

D．过程③应在培养基中加入除草剂和物质K

6．(2024·扬州高三一模)我国科学家利用XbaⅠ和SacⅠ两种限制酶，并运用农杆菌转化法，

将富含赖氨酸的蛋白质编码基因(含678bp)导入某植物细胞，再经植物组织培养获得转基因

植株，使赖氨酸的含量比对照组明显提高，如图表示相关培育过程(质粒的其他部位和目的基

因内部均无XbaⅠ、SacⅠ、HindⅢ的识别位点)，下列说法不正确的是()

A．一个内含目的基因的模板DNA经PCR扩增4次，共产生8个等长DNA分子

B．农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法

C．植物组织培养过程中，培养基需添加卡那霉素以便筛选转基因植株

D．使用SacⅠ和HindⅢ切割重组质粒后能得到1500bp左右的片段

7．(2024·永州高三三模)自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞

液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基