微生物的培养与应用--基础知识点复习说课讲解.pptVIP

选修1生物技术实践;基础自主复习;营养物质;液体;选择;温和;3．微生物培养的基本技术

(1)配制培养基：称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎。

(2)灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。;二、微生物的利用

1．菌种保藏

(1)临时保藏;2．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数;复合;选择培养;考点分类透析;一、微生物的营养要素及培养基配方

基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。;Evaluationonly.

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(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。

(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。;二、培养基的种类和用途;Evaluationonly.

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(1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。

(2)选择培养基一般只生长具有特定特点的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。;三、比较消毒和灭菌;四、微生物的纯化培养及菌种的保藏

1．原理

在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。

2．纯化分离的方法一——平板划线法(如图);3．纯化分离的方法二——稀释涂布平板法

Ⅰ.系列稀释操作(如图);Ⅱ.涂布平板操作如图所示;4．比较解读两种分离纯化方法;Evaluationonly.

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(1)两种接种方法作用不完全相同：平板划线法和涂布平板法都能使细菌纯化，但平板划线法不易分离出单个菌落，不能计数；涂布平板法能使单菌落分离，便于计数。

(2)涂布平板法的缺点：涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。;一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1??筛选菌株的原理

微生物的选择培养：在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。

2．统计菌落数目的方法

(1)显微镜直接计数法

①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。

②方法：用计数板计算。

③缺点：不能区分死菌与活菌。;(2)间接计数法(活菌计数法)

①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作：

a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。

b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。;Evaluationonly.

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Copyright2004-2011AsposePtyLtd.;3．土壤中纤维素分解菌的筛选流程

土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。;名师提醒

(1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。

(2)平板划线法只适合用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。

(3)分离能分解纤维素的微生物时，有时需要进行选择培养，选择培养的目的是增大选择对象在样液中的浓度，以确保用刚果红染色法鉴别时确实能得到所需菌种。;生物