紫外可见光分光光度法汇总培训课件.pptVIP

一、定性分析（一）定性鉴别定性鉴别的依据→吸收光谱的特征吸收光谱的形状吸收峰的数目吸收峰的位置（波长）吸收峰的强度相应的吸光系数*紫外可见光分光光度法汇总1.对比吸收光谱的特征值*紫外可见光分光光度法汇总2．对比吸光度或吸光系数的比值:例:*紫外可见光分光光度法汇总3.对比吸收光谱的一致性同一测定条件下,与标准对照物谱图或标准谱图进行对照比较*紫外可见光分光光度法汇总（二）纯度检查和杂质限量测定1.纯度检查（杂质检查）1）峰位不重叠:找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量2）峰位重叠:主成分强吸收，杂质无吸收/弱吸收→与纯品比较，E↓杂质强吸收主成分吸收→与纯品比较，E↑，光谱变形*紫外可见光分光光度法汇总2．杂质限量的测定:例:肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算2mg/mL-0.05mol/L的HCL溶液，λ310nm下测定规定A310≤0.05即符合要求的杂质限量≤0.06%*紫外可见光分光光度法汇总二、定量分析（一）单组分的定量方法1．吸光系数法2．标准曲线法3．对照法:外标一点法*紫外可见光分光光度法汇总1.吸光系数法（绝对法）*紫外可见光分光光度法汇总例:维生素B12的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度。解:*紫外可见光分光光度法汇总例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？解:*紫外可见光分光光度法汇总2.标准曲线法*紫外可见光分光光度法汇总芦丁含量测定0.710mg/25mL*紫外可见光分光光度法汇总3．对照法:外标一点法*紫外可见光分光光度法汇总（二）多组分的定量方法三种情况:1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰）两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量*紫外可见光分光光度法汇总λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Caλ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Cb2.两组分吸收光谱部分重叠*紫外可见光分光光度法汇总3.两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定（1）解线性方程组法（2）等吸收双波长消去法（3）导数法*紫外可见光分光光度法汇总非极性极性n??????非??极??非??极非极性极性??????非??极????非??极n→?*跃迁:蓝移；??；???→?*跃迁:红移；??；????max(正己烷)?max(氯仿)?max(甲醇)?max(水)???*230238237243n??*3293153093053.溶剂效应*紫外可见光分光光度法汇总溶剂效应1：乙醚2：水12250300苯酰丙酮非极性→极性n→?*跃迁:蓝移；??；???→?*跃迁:红移；??；??极性溶剂使精细结构消失；*紫外可见光分光光度法汇总4.pH值的影响：影响物质存在型体，影响吸收波长λmax=210.5nm,270nmλmax=235nm,287nm*紫外可见光分光光度法汇总光的吸收基本定律--

Lambert-Beer定律物理量:透光率及吸光度Lambert-Beer定律偏离Beer定律的因素透光率的测量误差第二节基本原理*紫外可见光分光光度法汇总图1光和物质发生作用示意图I入=I吸+I透+I反+I散I入=I吸+I透*紫外可见光分光光度法汇总透光率:透过光的强度与入射光强度之比。T越大,物质对光的吸收越弱;反之,越强。吸光度:反映物质对光的吸收强弱的物理量。A越大,物质对光的吸收越强;反之,越弱。一、物理量－透光率及吸光度*紫外可见光分光光度法汇总一、朗伯-比尔定律1.朗伯定律图2光的吸收基本定律示意图A=k1bA——吸光度k1——比例常数*紫外可见光分光光度