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食品中禁用脂溶性合成色素的测定

1范围

本标准规定了食品中禁用脂溶性合成色素（见附录A）的测定液相色谱-串联质谱法。

本标准适用于辣椒粉、调味酱、豆制品、熟肉制品、蛋等食品中32种禁用脂溶性合成色素的测定。

2规范性引用文件

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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T33087仪器分析用高纯水规格及试验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4方法原理

试样经1%乙酸-乙腈提取，C18分散萃取小管净化后，利用液相色谱-串联质谱仪测定，内标法或外标法定量。

5试剂和材料

除另有说明，本实验使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水或GB/T33087中规定的高纯水。

5.1甲醇（CH4O）：色谱纯。

5.2乙腈（C2H3N）：色谱纯。

5.3乙酸（CH?COOH）：质谱纯。

5.4三氯甲烷（CHCl?)。

5.5十八烷基硅烷键合硅胶（C18材料）：粒径40~60μm。

5.61%乙酸-乙腈：1mL乙酸用乙腈定容到100mL。

5.7标准品：脂溶性合成色素标准品见附录B，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

5.8标准溶液配制

5.8.1标准储备溶液（1000mg/L）：分别准确称取经折算相当于50mg（精确到0.1mg）的色素标准品，用合适的溶剂（三氯甲烷、乙腈或甲醇）溶解后，转移至50mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.2混合标准储备溶液A组（1mg/L）：根据附录A化合物的浓度分组，准确移取0.10mL的A组色素标准储备溶液于100mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.3混合标准储备溶液B组（10mg/L）：根据附录A化合物的浓度分组，准确移取1.00mL的B组色素单标储备溶液于100mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.4内标储备液（1000mg/L）：分别准确称取经折算相当于50mg（精确到0.1mg）的内标标准品，置50mL容量瓶中，用合适的溶剂（三氯甲烷、乙腈或甲醇）溶解后，甲醇定容到刻度。

5.8.5混合内标储备液（10mg/L）：分别准确移取1mL的内标储备溶液于100mL容量瓶中，用甲醇定

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容到刻度。

5.8.6混合标准中间液A组（0.1mg/L）：准确吸取1.00mL的混合标准储备溶液A组于10mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.7混合标准中间液B组（1.0mg/L）：准确吸取1.00mL的混合标准储备溶液B组于10mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.8混合内标中间液（0.01mg/L）：准确吸取一定量的混合内标储备溶液，用甲醇稀释、定容至刻

度。

5.8.9混合标准工作液：根据需要，用甲醇将混合标准中间液和混合内标中间稀释成所需的标准工作

溶液。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱联用仪（LC-MS/MS）：配有电喷雾电离源（ESI）。

6.2分析天平：感量为0.1mg、0.01mg。

6.3离心机：转速不低于8000r/min。

6.4超声波清洗器。

6.5匀浆机。

6.6食物粉碎机。

7分析步骤

7.1试样制备

豆制品、熟肉制品用食物粉碎机搅碎混匀；蛋煮熟后取蛋黄用食物粉碎机搅碎混匀。

7.2试样提取

称取2.00g（准确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入混合内标储备液0.05mL，加入10mL的1%乙酸-乙腈，超声5min，在8000r/min下离心5min，重复提取一遍，合并上清液。取1mL上清液，用甲醇定容至5mL。准确移取2.00mL提取液至含有50mgC18材料的净化管中，涡旋1min，在8000r/min下离心5min，上清液过0.22μm膜，待测。每个样品做2个平行测试，同时做空白测试。

7.3仪器参考条件

7.3.1液相色谱参考条件

a)色谱柱：C18柱，100mm×2.1mm，1.7μm，或同等性能的色谱柱；

b)流动相：A为0.1%乙酸水，B为0.1%乙酸-甲醇；梯度洗脱条件见表1；

c)柱温：40℃;

d)进样量：2μL；

e)流速：0.3mL/min。

表1液相色谱梯度洗脱条件

时间（min）

流动相A（%）

流动相B（%）

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