植物生理必修课实验课件.pptVIP

植物生理学实验;植物组织中自由水、束缚水含量的测定;三、仪器设备与试剂试材

仪器阿贝折射仪、分析天平、烘箱、钻孔器、干燥器、称量瓶、移液管等。

试剂质量浓度65％-75％蔗糖溶液

试材新鲜土豆

;植物组织渗透势的测定;三、仪器设备与试剂试材

仪器显微镜等

试剂0.1、0.2-0.8mol/L的蔗糖溶液

试材洋葱

四、实验步骤：

1.配制0.1、0.2-0.8mol/L的蔗糖溶液浓度梯度；

2.浸入洋葱表皮5-10分钟

3.显微镜观测找到未产生质壁分离的最高浓度和产生初始质壁分离的浓度，算出其平均值即等渗溶液的浓度。

;五、计算

计算公式：фs=-RTic

式中фs为植物组织细胞渗透势，以bar表示；i为解离系数，蔗糖是1；R为气体常数，0.083L?bar/mol?K；T为绝对温度，K（即273℃＋t，t为实验温度℃）；c为等渗溶液浓度，mol/L）。;植物组织水势的测定一小液流法;四、实验步骤：

1.外界溶液的配制与渗透作用

①配制0．1～0．8mol/L8个梯度的蔗糖溶液各5ml，注入8只试管中，并分别加上塞子后编号，作为对照组。将8只青霉素小瓶编号，分别从对照组中相同编号的试管中取蔗糖溶液4ml注人各瓶，加上塞子作为实验组。

或配制8个梯度的蔗糖溶液各10ml取5ml作为对照组，另外5ml加入另外一组试管作为实验组。

②用剪刀或打孔器将玉米等植物的叶片（块茎）打成大小相同（约0．5cm）的小块（土豆再切为薄小原片），每瓶中投人20-40小块（约占1/4溶液体积），塞好塞子，放置30min。在此期间摇动小瓶数次。

③用针尖挑取少许甲烯蓝粉末加入上述各青霉素瓶中，摇匀，此时溶液为浅蓝色。;五、计算

计算公式：фW=-RTiC

式中фW为植物组织水势，以bar表示；i为解离系数，蔗糖是1；R为气体常数，0.083L?bar/mol?K；T为绝对温度，K（即273℃＋t，t为实验温度）.

[注意事项]

1．叶片投入小瓶要快，小瓶及时加盖，防止叶内或小瓶中水分蒸发影响实验结果。

2．加人实验组的甲烯蓝粉末量不宜过多，以免影响溶液的比重。

3．胶头细玻璃弯管要各溶液专用，如用一只弯管则应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。

4．释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。

5．观察液滴??动状况最好放在一个白色的背景下进行。;一、原理;二、仪器与试剂;三、实验步骤;3.标准曲线制作

取6支洁净烘干的试管按表1-2顺序加试剂，摇匀后于30℃恒温水浴中反应30min显色，然后在520nm波长下比色。以0μg/mL浓度为参比，亚硝态氮（μg）为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线或建立回归方程。;四、结果计算;硝酸盐还原为亚硝酸盐（植物体内由硝酸还原酶（NR）催化）。

产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对–氨基苯磺酰胺）及α–萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。;生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰，可用分光光度法测定。;２０﹪醋酸溶液；KNO3标准液；

混合粉剂

实验材料洗净的小白菜、小麦、玉米等作物叶片;1.标准曲线制作：

取7支洁净烘干的15ml刻度试管按顺序加试剂，即配成0～2.0μg的系列标准硝态氮溶液。摇匀后在30℃保温箱或恒温水浴中保温30min，然后在５２０nm波长下比色。以硝态氮（μg）为横坐标，光密度值为纵坐标绘标准曲线。;磷素的测定;二、仪器与试剂?

1.仪器722可见分光光度计?

2.试剂?

（1）?50ug/ml标准磷溶液（0.2195g分析纯KH2PO4溶于400ml去离子水，加入5ml浓硫酸，定容至1L）?

（2）?2.5%钼酸铵与3mol硫酸1:1等体积混合。

（3）a-1、2、4氨基萘酚磺酸钠溶液：0.25ga-1、2、4氨基萘酚磺酸钠、0.5g亚硫酸钠溶于100ml水中，使用前再加水3份混合均匀。

3.实验材料：小白菜;三、?操作步骤?

3.1磷标准曲线：分别吸取标准储备液配成0、5、10、20、25、30、35、40、45、50ug/ml梯度各1ml，然后依次加入3ml钼酸铵-硫酸混合溶液，摇匀再加a-1、2、4氨基萘酚磺酸钠溶液0.5ml,混匀，置于37度水浴10分钟，以0浓度为参比，选波长660nm处分别测定其吸光度，由此计算出回归系数，利用回归方程计算或绘制成校正曲线。

3.2?样品中磷的提取与测量：取干净小麦或小白菜等植物功能叶叶鞘2-4g，于研钵中加少量石英砂及5ml水研磨，匀浆转入25或50ml容量瓶或量筒，蒸馏水定容。取5ml上述提取液于3000g离心15分钟，取两份1ml上清液