甲醛滴定法测定溶液中的氨基酸含量演示教学.pdfVIP

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甲醛滴定法测定溶液

中的氨基酸含量

精品资料

甲醛滴定法测定氨基酸含量

一、目的

掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点

二、原理

水溶液中的氨基酸为兼性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。

+

甲醛可与氨基酸上的一NH结合,形成一NH—CHOH、一N(CH—

322

)++

OH2等羟甲基衍生物,使NH3上的H游离出来,这样就可以用碱滴定

++

NH3放出H,测出氨基氮,从而计算氨基酸的含量。

若样品中只含有单一的已知氨基酸,则可由此法滴定的结果算出氨基酸

的含量。若样品中含有多种氨基酸(如蛋白质水解液),测不能由此法算出

氨基酸的含量。

脯氨酸与甲醛作用后,生成的化合物不稳定,导致滴定后结果偏低;酪

氨酸含酚基结构,导致滴定结果偏高。

三、材料、试剂与器具

(一)试剂

1、1%酚酞酒精溶液

称1g酚酞溶于100ml95%酒精中。

2、0.5%溴麝香草酚蓝溶液

取0.5溴麝香草酚蓝溶于100ml20%乙醇溶液中。

2

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精品资料

3、氨基酸溶液

4、标准0.100mol/L氢氧化钠溶液

5、中性甲醛溶液

取甲醛溶液50ml,加1%酚酞指示剂2滴,滴加0.1mol/LNaOH

溶液,使溶液呈微粉红色,临用前中和。

(二)实验器具

1、锥形瓶2、碱式滴定管

3、移液管洗耳球4天平

5、容量瓶6试剂瓶

7、量筒8玻棒与烧杯

四、操作步骤

1350ml

、取只锥形瓶,按下表加入试剂

锥形瓶编号样品1样品2空白

试剂

氨基酸溶液或样品(ml)1.01.0—

蒸馏水(ml)5.05.06.0

ml

中性甲醛溶液()5.05.05.0

222

0.05%溴麝香草酚蓝溶液(滴)

1%酚酞乙醇溶液(滴)222

2、混匀后用标准0.100mol/L氢氧化钠溶液滴定至紫色

(pH8.7~9.0)

3

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精品资料

3、结果计算

氨基酸溶液中含氨基酸的百分比浓度为

C=V-VxCX/10W

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