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甲醛滴定法测定溶液
中的氨基酸含量
精品资料
甲醛滴定法测定氨基酸含量
一、目的
掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点
二、原理
水溶液中的氨基酸为兼性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。
+
甲醛可与氨基酸上的一NH结合,形成一NH—CHOH、一N(CH—
322
)++
OH2等羟甲基衍生物,使NH3上的H游离出来,这样就可以用碱滴定
++
NH3放出H,测出氨基氮,从而计算氨基酸的含量。
若样品中只含有单一的已知氨基酸,则可由此法滴定的结果算出氨基酸
的含量。若样品中含有多种氨基酸(如蛋白质水解液),测不能由此法算出
氨基酸的含量。
脯氨酸与甲醛作用后,生成的化合物不稳定,导致滴定后结果偏低;酪
氨酸含酚基结构,导致滴定结果偏高。
三、材料、试剂与器具
(一)试剂
1、1%酚酞酒精溶液
称1g酚酞溶于100ml95%酒精中。
2、0.5%溴麝香草酚蓝溶液
取0.5溴麝香草酚蓝溶于100ml20%乙醇溶液中。
2
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精品资料
3、氨基酸溶液
4、标准0.100mol/L氢氧化钠溶液
5、中性甲醛溶液
取甲醛溶液50ml,加1%酚酞指示剂2滴,滴加0.1mol/LNaOH
溶液,使溶液呈微粉红色,临用前中和。
(二)实验器具
1、锥形瓶2、碱式滴定管
3、移液管洗耳球4天平
5、容量瓶6试剂瓶
7、量筒8玻棒与烧杯
四、操作步骤
1350ml
、取只锥形瓶,按下表加入试剂
锥形瓶编号样品1样品2空白
试剂
氨基酸溶液或样品(ml)1.01.0—
蒸馏水(ml)5.05.06.0
ml
中性甲醛溶液()5.05.05.0
222
0.05%溴麝香草酚蓝溶液(滴)
1%酚酞乙醇溶液(滴)222
2、混匀后用标准0.100mol/L氢氧化钠溶液滴定至紫色
(pH8.7~9.0)
3
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3、结果计算
氨基酸溶液中含氨基酸的百分比浓度为
)
C=V-VxCX/10W
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