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淋球菌的分离培养;
1.方法
由男性病人尿道取材时,可用接种环或小棉拭子伸入尿道2~4cm,转动后取出分泌物(应略带黏膜)。从女性病人取材时,应先用温水湿润扩阴器(不要用液状石蜡等润滑油)再用扩阴器暴露宫颈口,用棉拭子揩去宫颈口的脓性分泌物后,再用第2个棉拭子插入宫颈管1cm,转动并停留10~20s,让棉拭子充分吸附分泌物。标本取后立即接种于培养基中。目前国内多用血液琼脂或巧克力琼脂培养基。
初代培养分离时应使用5%~10%CO2环境(烛缸),温度为35~36℃,相对湿度>80%,培养24~48h观看结果。;
2.结果
淋球菌于培养分离后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰色黏性的菌落,边缘呈花瓣状,直径0.5~1.0cm。继续培养,菌落表面毛糙,周边起皱,再继续则萎缩、脱落。;
3.鉴定
(1)培养物涂片检查:有2个、4个、8个革兰阴性双球菌。
(2)生化反应:①氧化酸试验,用0.5%~1.0%盐酸四甲基对苯二胺滴在菌落上,颜色变成紫黑色为阳性;②糖发酵试验,适用于咽及直肠部采样的标本,以区别脑膜炎双球菌。;
4.注意事项
(1)取材时伸入尿道或宫颈的深度一定要够。
(2)标本离体时间越短越好。
(3)分离时应采用加抗生素的选择性培养基。
(4)对症状不典型的男病人,最好在晨起首次排尿前或排尿后2~3h采取标本。;
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