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一、色谱法介绍
色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适宜的检测手段,就成为色谱分析法。
色谱法的最早应用是在1906年俄国植物学家茨维特(Tswett)用于分离植物色素时采用,其办法是这样的:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。;;
一、色谱法介绍
色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适宜的检测手段,就成为色谱分析法。
色谱法的最早应用是在1906年俄国植物学家茨维特(Tswett)用于分离植物色素时采用,其办法是这样的:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。;色谱来源;此时,玻璃管的上端立刻出现几个颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗,随着石油醚的加入,谱带不停地向下移动,并逐步分开成几个不同颜色的谱带,继续冲洗就可分别接得多个颜色的色素,并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。
现在的色谱法早已不局限于色素的分离,其办法也早已得到了极大的发展,但其分离的原理仍然是同样的。我们仍然叫它色谱法。;在色谱法中,将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相(固体或液体)称为固定相;
自上而下运动的一相(普通是气体或液体)称为流动相;
装有固定相的管子(玻璃管或不锈钢管)称为色谱柱。;当流动相中样品混合物通过固定相时,就会与
固定相发生作用;
由于各组分在性质和构造上的差别,与固定相
互相作用的类型、强弱也有差别;
因此在同一推动力的作用下,不同组分在固定
相滞留时间长短不同;从而按先后不同的次序从固
定相中流出。;色谱法发展的历史:
1906年俄国植物学家Tswett命名自己发明的分离植物色素的新办法为色谱法。由于他并不是一种出名的学者,因此他发表出来的文章并没有得到重视。
1931年,德国的Kuhn和Lederer重复了Tswett的实验,得到较好的成果,色谱法因此得到很大的推广。
1940年,Martin和Synge提出了液液分派色谱法,???把塔板的概念引入色谱法中,初步建立了塔板理论。;1941年,Martin和Synge提出了用气体替代流体做流动相的可能性,在他们发展了完整的气液色谱法之后,获得了1952年的诺贝尔化学奖。
1957年,Golay开展了开管柱气相色谱。
1963年,Giddings把高压泵和键合相固定相结合,出现了高效液相色谱。
随即,出现了色谱法和其它检测技术的联用,例如GC-MS、GC-IR等。
上个世纪八十年代,毛细管电泳出现,此后得到长足的发展,并不停出现新的模式,始终成为研究的热点。;二、色谱法的分类
色谱分析法有诸多个类,从不同的角度出发能够有不同的分类办法。;(一)从两相的物理状态分类:
色谱法中,流动相能够是气体,也能够是液体,由此可分为气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。固定相既能够是固体,也能够是涂在固体上的液体,由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。流动相还能够是超临界流体。
;物质普通有三种状态:气态,液态和固态。
除了这三种常见的状态外物质尚有另外的某些状态,如等离子状态、超临界状态等。;物质处在临界温度(Tc)和临界压力(Pc)以上状态时,向该状态气体加压,气体不会液化,只是密度增大,含有类似液态性质,同时还保存气体性能,这种状态的流体称为超临界流体(SupercriticalFluid,简称SCF)。
高于临界温度和临界压力的状态称为超临界状态。处在超临界状态时,气液两相界面消失,性质非常靠近,以至于无法分辨,故称之为超临界流体。
这种流体(SCF)兼有气液两重性的特点,它现有与气体相称的高渗入能力和低的粘度,又兼有与液体相近的密度和对许多物质优良的溶解能力。;色谱法;(二)按固定相的形式分类:
按固定相的状态可分为柱色谱和平板色谱:
柱色谱:固定相装在色谱柱中;
平板色谱:固定相呈平板状的色谱,它又可分
为薄层色谱和纸色谱。
薄层色谱:将固体吸附剂在玻璃板或塑料
板上制成薄层作固定相;
纸色谱:运用滤纸作载体,吸附在纸上的
水作固定相。;(三)按分离原理分类:
可分为:
吸附色谱法:运用吸附剂(固定相普通是固
体)表面对不同组分吸附能力的差别进行分
离的办法;
分派色谱法:运用不同组分在两相间
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