蓝耳GP5抗体检测及分析.doc

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蓝耳GP5抗体检测及分析

讲者:李雪平,广州悦洋生物技术有限公司

近三十年来,蓝耳病一直是焜耀我国养猪业最重要的疾病之一,并且多次出现重大疫情。有毒株多,变异块,流行广的特点。

在蓝耳抗体检测靶标中,N抗体主要用于诊断,GP5是诱导中和抗体的结构蛋白,中和抗体产生晚28天,但持续时间长,中和抗体与抵抗力有直接关系,可判定机体抵御病毒的能力。

通过AI算力分析PRRSV结构蛋白GP5和二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,把GP5蛋白胞外区的诱骗表位切掉,选取GP5蛋白具有相应中和表位蛋白作为免疫原,将其作为包被抗原,研发了蓝耳病病毒GP5蛋白试剂盒。敏感度84.9%,特异性80.9%,GP5试剂盒与中和试验的符合性为82.8%。通过对不同毒株的中和试验,得出与临床样本符合率高。通过37℃环境下的高温稳定性测试、人员重复性得出试剂盒具备较高稳定性。

用未免疫蓝耳疫苗猪场的猪只做测试,通过灭活苗免疫三月后检测,活苗免疫三个月后检测,从未免疫蓝耳疫苗猪场的检测,攻毒后抗体消长的四个案例分析。

可以得出PRRSV低N蛋白抗体稳定场,GP5蛋白抗体水平基本较高。GP蛋白抗体水平走低,一段时间内猪群可能会走向不稳定。因此,GP5抗体水平的高低可以作为猪场蓝耳病是否稳定的预警参考指标。

传统意义的双阴性,PRRS抗原阴性,N抗体阴性猪群,有实用价值。N蛋白抗体消退快,GP抗体提升慢,但持续时间长。建议猪场增加GP抗体检测。GP抗体ELISA试剂盒与中和实验有较好的相关性,适用于免疫效果评估的结论。

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