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第三节聚合酶链反响〔polymerase
第三节聚合酶链反响〔polymerase
chainreaction,PCR〕
chainreaction,PCR〕
lPCR是模拟体内DNA复制条件，应用DNA聚
lPCR是模拟体内DNA复制条件，应用DNA聚
合酶反响，特异性扩增某一DNA片段的技术。
合酶反响，特异性扩增某一DNA片段的技术。
l体外程序化的DNA合成技术。
l体外程序化的DNA合成技术。
精选ppt1
精选ppt1
PCR
PCR
精选ppt2
精选ppt2
原理：
原理：
1〕合成待扩增区域两端序列，与模板DNA互补的寡
〕合成待扩增区域两端序列，与模板互补的寡
1DNA
核苷酸特异性引物，引物的序列决定扩增片段的
核苷酸特异性引物，引物的序列决定扩增片段的
长度；
长度；
2〕反响体系：DNA模板，dNTP，TaqDNA聚合酶，
〕反响体系：模板，，聚合酶，
2DNAdNTPTaqDNA
buffer
buffer
3〕反响程序：变性94~95oC
〕反响程序：变性
394~95oC
复性延伸
复性延伸
37~55oC70~72oC
37~55oC70~72oC
72oC延伸10min
72oC延伸10min
DNA扩增100万倍
扩增万倍
DNA100
精选ppt3
精选ppt3
PCR扩增
PCR扩增
精选ppt4
精选ppt4
PCR特点及应用：
PCR特点及应用：
l特点：〔1〕特异性强，灵敏度高，稳定可靠，快
l特点：〔〕特异性强，灵敏度
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