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9-
阶段综合检测(二)(选修3)
(30分钟100分)
非选择题:本题共7小题,共100分。
1.(14分)图中甲、乙分别表示质粒和含目的基因的DNA片段。几种可供选择运用的限制酶识别序列及其切割位点为EcoRⅠ:-G↓AATTC-;BamHⅠ:-G↓GATCC-;BclⅠ:-T↓GATCA-;Sau3AⅠ:-↓GATC-。
注:tetR表示四环素抗性基因;ampR表示氨苄青霉素抗性基因。
回答下列问题:
(1)限制酶的作用是识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的__________________断开。题中可供运用的限制酶,切割相应DNA片段后能产生黏性末端的有____________________________。?
(2)经限制酶Sau3AⅠ切割后得到的DNA片段可以与上述其余限制酶中的______
__________________(填限制酶名称)切割后得到的DNA片段连接,理由是______
__________________________。图甲质粒经Sau3AⅠ完全切割后可得到____种DNA片段。?
(3)为防止限制酶切割后的DNA片段自身环化,在基因工程中通常运用两种切割
后产生不同黏性末端的限制酶切割同一DNA分子。由此分析,图甲应当运用____
________(填限制酶)进行切割,图乙应当运用_____________________________
(填限制酶)进行切割。?
(4)图甲中的tetR和ampR在运载体上可作为________________,用于重组DNA的鉴定和选择。?
【解析】(1)限制酶的作用是识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。题中可供运用的限制酶切割相应片段后都会产生黏性末端,因此切割相应DNA片段后能产生黏性末端的有EcoRⅠ、BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ。
(2)经限制酶Sau3AI切割后得到的DNA片段可以与上述其余限制酶中的BamHⅠ、BclⅠ切割后得到的DNA片段连接,理由是它们切割后产生的片段具有相同的黏性末端。图甲质粒有三个Sau3AⅠ的酶切位点,所以经Sau3AⅠ完全切割后可得到3种DNA片段。
(3)为避开限制酶切割后的DNA片段自身环化,应当用不同的酶切割DNA的两端,由此分析,图甲应当运用BclⅠ和EcoRⅠ进行切割,图乙应当运用Sau3AⅠ和EcoRⅠ进行切割。
(4)图甲中的tetR和ampR都是抗性基因,在运载体上可以作为标记基因,用于重组DNA的鉴定和选择。
答案:(1)磷酸二酯键EcoRⅠ、BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ(2)BamHⅠ、BclⅠ它们切割后产生的片段具有相同的黏性末端3(3)BclⅠ和EcoRⅠSau3AⅠ和EcoRⅠ(4)标记基因
【加固训练】
(2024·揭阳模拟)在某些深海鱼中发觉的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒实力有较好的应用价值。如图所示是获得转基因莴苣的技术流程,请据图回答下列问题:
(1)获得目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分别和___________
_____。?
(2)①过程须要的酶有________________、________________。?
(3)重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外,还必需含有____________、终止子和________________等,这样才能构成一个完整的基因表达载体。?
(4)假如受体细胞C1是土壤农杆菌,则将目的基因导入它的________________,使目的基因进入受体细胞C2,并将其插入受体细胞C2中________________上,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达,形成转基因莴苣,这个过程称为__________________。经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达,在分子水平上可用__________________法进行检测,假如?
出现杂交带,说明目的基因已经表达蛋白质产品,转基因莴苣培育胜利。
【解析】(1)基因工程中,获得目的基因主要包括从已有的物种中分别和用化学方法人工合成。
(2)图中①过程是将目的基因和运载体相连接构成重组质粒的过程,须要用同种
限制酶切割目的基因和运载体(质粒),并用DNA连接酶将目的基因和运载体(质粒)连接起来。
(3)重组质粒除了目的基因外,还须要有启动子、终止子和标记基因,其中标记基因利于目的基因的筛选。
(4)农杆菌具有转化作用,其Ti质粒上的T-DNA能将外源基因整合到宿主细胞染色体的DNA上,因此应当将目的基因导入它的Ti质粒的T-DNA上,使目的基因进入受体细胞C2
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