细胞膜的功能筏及膜穴系统.ppt

********************************1.MDCK细胞的来源：

MDCK是S.H.MADIN于1958年9月建成，来源于考克斯班尼犬肾脏，该肾脏细胞原代培养时其形态类似于成纤维细胞，经过胰蛋白酶和EDTA混合消化液的连续6次消化法纯化而上皮样细胞，每次纯化间隔时间为7D。培养中MDCK细胞具有远段肾小管与集合管，来源细胞的分化特性。MDCK细胞株至少有两种细胞类型，一种命名为C5A，其在含I型胶原的培养物中生长时，能分泌液体，导致囊肿形成，但在塑料面的培养低物上培养时，能分泌液体，却不能形成囊肿，另一种细胞正好相反。

2.MDCK细胞的用途：

MDCK细胞被广泛用作远曲小管或集合管的模型，还可用于代谢研究和Pg级药物与药物相互作用研究以及观察流感病毒株对细胞功能的影响。

3.MDCK细胞的培养，的确有的用DMEM培养基，有的用MEM培养基，培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199等培养基中同样很容易生长。所以我认为你可以任意选择。我过去比较喜欢用DMEM培养基。

4.高糖DMEM与低糖DMEM的区别是：

高糖DMEM的葡萄糖含量是25.5mmol/L,而低糖DMEM的糖含量是5.5mmol/L,其中低糖DMEM的糖含量与一般的培养基相同，所以可以和其他一般培养基通用，而高糖DMEM主要用在肿瘤等特殊细胞的培养，如何选择需要依照要求而定。我建议你用低糖DMEM培养基。

5.血清最好使用胎牛血清，没有也可以用小牛血清。胎牛血清价格相对贵一点。

**A.在Golgi体形成含功能筏的分选囊泡并运到细胞表面B.穿梭囊泡从内质网运输胆固醇及其它脂质C.GPI及脂锚定蛋白在功能筏富集D.其它膜蛋白通过与锚定蛋白相互作用在功能筏富集和组装，形成膜穴**朊病毒疾病即海绵状脑病，是人和动物共患的一类遗传性、传染性和散发性的中央神经系统退行性脑病，最终可以导致患者死亡。在动物中，朊病毒能导致羊瘙痒病、牛疯牛病、可传染性貂脑病、鹿和麋的慢性消瘦病等；在人类中，朊病毒能导致库鲁病、克-雅氏病（CJD）、格氏病（GSS）、致死性家族失眠症（FFI）等。这类疾病的主要症状是大脑功能伴随着星形胶质细胞的增生和蛋白酶抗性的朊病毒蛋白（PrP）的积聚而衰退，有时产生淀粉样斑。

朊病毒疾病是一场灾难，从1986年英国首次爆发疯牛病开始，十几年里，已有17.7万头牛感染疯牛病，上百万头牛被屠杀。而专家警告说，仍有几百万头携带朊病毒的牛末被检测出来。而且，由于疯牛病可以传染给人类（已发现了64人感染病例），这更引起了人们对朊病毒疾病的高度警惕和重视。在欧洲，朊病毒疾病对医学、农业、经济和政治的影响，可能已大大超过了艾滋病（AIDS）。

许多年来，人们一直在艰难地探索着朊病毒疾病的致病机理。这种引发朊病毒疾病的病原--朊病毒（Prion），早在上世纪60年代就被Griffith认为可能是一种缺少核酸的蛋白。后来，这种唯蛋白假说被Prusiner详尽阐明，Ptusiner也因此而获得1997年度诺贝尔生理/医学奖。这种假说认为，在神经元细胞的外表面，有一种正常的细胞蛋白，具有一定的构型，称为PrPc；在某些情况下，这种正常型蛋白可以发生构型转变，成为具有蛋白酶抗性的致病型蛋白PrPsc，从而引发朊病毒疾病。虽然这种假说在日臻完善，并成为朊病毒致病机理的主流假说，但其仍存在很多问题，比如构型转变机制，致病机制等。

鉴于朊病毒疾病的重大危害性和特殊性，特别是发病时无免疫反应，潜伏期又长，在人类可长达几十年，这比艾滋病的诊断还要困难，而当前进行治疗还有相当距离，因此进行有效的诊断是目前科学界面临的一大问题。下面从三个方面分析探讨当前先进的朊病毒疾病的诊断技术，特别是最主流的免疫诊断技术。⑶信号转导细胞膜脂类分布的区域化使不同蛋白质被限制在不同的区域在功能筏中发现多种信号转导相关分子GPI锚蛋白的富集可根据细胞类型激活不同的信号途径Ⅰ筏中被激活的酶可水解GPI产生第二信使ⅡGPI蛋白的富集为与其作用的信号转导蛋白相互作用提供了平台功能筏可将受体浓缩加速与配体的结合避免信号途径的交叉，保证信号转导的准确性第64页,共81页，星期六，2024年，5月①酪氨酸激酶(tyrosinekinase,PTK)PTK使与之偶联的受体磷酸化，激活级联反应PTKs富集于功能筏之中PTK的靶分子也富集于功能筏之中功能筏是PTKs介导的信号转导场所功能筏介导细胞信号转导②GTP结合蛋白(G-蛋白)G-