血浆纤维蛋白原Bβ基因多态性与小儿重症感染相关性研究.pdfVIP

血浆纤维蛋白原Ｂβ基因多态性与小儿重症感染相关性研究

摘要目的：探讨血浆纤维蛋白原Bβ基因多态性与小儿重症感染的相关性。

方法：采用酚-氯仿抽提法提取外周血基因组DNA，采用RFLP方法确定β纤维

蛋白原-455A/G基因多态性，通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行分析。观察组与对

照组之间进行逐个等位基因的比较，以相对危险度（OR）计算。结果：①观察

组三种基因型分布频率中，AA基因型最高，AG基因型次之，GG基因型最低；

等位基因分布频率中，观察组以A等位基因为主，对照组以G等位基因为主。

有统计学意义。②肺炎合并心衰竭组FGBβ-455A/G基因型及频率与未合并心衰

组有显著不同，经卡方检验有统计学意义。③小儿肺炎FGBβ-455A/G基因型，

AA型发病相对危险度为9.25，GA型的发病相对危险度为1.25，GG型发病相对

危险度为0.17。AA基因型可能是小儿肺炎的易感基因。结论：本研究提示

FGBβ-455A/G基因型与小儿肺炎发病相关，与肺炎合并心衰亦有一定的相关性，

推测FGBβ-455A/G基因型可能与病情严重程度有关。

关键词纤维蛋白原基因肺炎

资料与方法

观察组：2003年1月～2005年10月在我院内科住院的感染患者共176例，

男94例，女82例；年龄：3天～14岁，平均年龄3.90±1.15岁；病种包括新生

儿肺炎22例，支气管肺炎95例，毛细支气管炎14例，肺炎支原体肺炎26例、

小儿肠炎19例。诊断标准依照第六版《儿科学》。对照组：同一地区在门诊体检

的健康儿童，共55例，年龄1个月～12岁，平均年龄4.5±2.9岁，男37例，女

18例。

方法：①外周血基因组DNA提取：抽取外周静脉1ml，2%EDTA100μl抗凝，

-20℃冰冻保存。②染色体DNA提取采用酚-氯仿抽提法。

③β纤维蛋白原-455A/G基因多态性的检测：PCR引物参照Mannuccci等方

法设计。④PCR扩增。⑤扩增产物用HaeⅢ酶消化。

结果

通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行分析：根据PCR片段的大小判断FGβ-455

基因多态性。统计学分析方法：采用直接记数法计算基因型和等位基因频率，

两组间差异比较采用卡方（X2）检验。观察组与对照组之间进行逐个等位基因

的比较，以相对危险度（OR）计算。

基因型：PCR扩增产物为一条446bp片段。PCR产物经HaeⅢ酶切后发现，

三种基因片段。①FGBβ-455GG型，产生348bp及98bp两个片段；②FGBβ-455AA

型，仅有1个446bp片段；③FGBβ-455GA型，产物为446bp、348bp及98bp3

个片段。

FGBβ-455A/G基因型与等位基因频率分布：观察组与对照组比较，三种基

因型及两种等位基因明显不同。观察组三种基因型分布频率为AA基因型最高，

AG基因型次之，GG基因型最低；等位基因分布频率为观察组以A等位基因为

主，对照组以G等位基因为主。经卡方检验差异有明显统计学意义。X2值分别

为32.18(P＜0.005)和45.89(P＜0.005)。

FGBβ-455A/G基因型与疾病严重程度的相关性：小儿肺炎患者病情严重，

常常出现心力衰竭。在观察组109例支气管肺炎和毛细支气管炎中合并心力衰竭

的患儿有43例。我们对合并心力衰竭与未合并心衰者各基因型分布进行比较，

心衰组AA、AG、GG基因型频率分别为0.488、0.302、0.209，A、G等位基因

频率为63.95和36.05，较未合并心衰组有显著增高，经卡方检验有统计学意义

（P＜0.01，P＜0.005）。

FGBβ-455A/G基因型与小儿肺炎发病的关系：在157例肺炎患儿和50例非

肺炎小儿中FGBβ-455A/G基因AA型为74例、AG型61例、GG型72例。AA

型发病相对危险度为9.25，GA型的发病相对危险度为1.25，GG型发病相对危

险度为0.17。这说明FGBβ-455G/A与小儿肺炎的发生有关；AA基因型可能是

小儿肺炎的易感基因。

讨论

研究认为，感染的发生、发展与β-纤维蛋白原多态性有关。本组结