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复习材料
第61课时基因工程的基本工具和基本操作程序
1.概述基因工程是在微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展
课标要求起来的。2.阐明重组DNA技术的三种基本工具。3.阐明基因工程的基本
操作程序。
2023·新课标·T62021·全国乙·T382021·湖
1.基因工程的基本工具
北·T7
考情分析2023·全国乙·T382023·全国甲·T382023·湖
2.基因工程的基本操作
北·T42023·广东·T20
程序
2021·广东·T22
考点一基因工程的基本工具
1.基因工程的概念
2.基因工程的诞生和发展
(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明了DNA是遗传物质,还证明了DNA可在同种生物不同个体
之间________。
(2)DNA双螺旋结构的提出和______________的证明。
(3)中心法则的确立。
(4)______________的破译。
(5)基因转移载体的发现。______________________________的发现为DNA的切割、连接以
及功能基因的获得创造了条件。
(6)________体外重组的实现。
(7)重组DNA表达实验的成功。
(8)DNA测序和合成技术的发明。
(9)________技术的发明。
(10)________________技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。
3.重组DNA技术的基本工具
(1)限制性内切核酸酶(简称“限制酶”)
提醒①限制酶的识别序列一般由6个核苷酸组成,少数由4个、8个或其他数量的核苷酸组
成。
②限制酶作用的化学键只能是磷酸二酯键。
③在切割含目的基因DNA分子时,需用限制酶切割两次此DNA分子,产生4个末端。只
复习材料
有这样才能使目的基因的两端都有可连接的黏性末端或平末端。
(2)DNA连接酶
(3)载体
(1)基因工程是人工操作导致的染色体变异,变异是不定向的()
(2)DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键,形成重组DNA()
(3)限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶()
(4)质粒通常采用抗生素合成基因作为标记基因()
将从苏云金杆菌中获取Bt基因转入棉花细胞内培育转基因抗虫棉的过程中,需借助多种分
子工具且经历多个操作步骤。实验人员使用限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割质粒。如图表示常用
的限制酶识别序列和切割位点以及质粒上的限制酶切割位点。请思考以下问题:
(1)请用图示法写出限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割后形成黏性末端的过程。
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
(2)切割图示中的目的基因应选用哪类限制酶?请说明理由。
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
归纳总结限制酶的选择
(1)不破坏目的基因原则:如图甲中可选择PstⅠ,而不选择SmaⅠ。
(2)保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则:质粒作为载体必须具
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