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血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对大鼠内毒素性急性肺损伤的保护作用

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂对大鼠内毒素性急性肺损伤

(ALI)的保护作用。方法取wistar大鼠60只，雌雄不拘，随机分为三组：(1)

正常对照组(10只)，给予大鼠静注等量生理盐水；(2)大肠肝菌脂多糖(LPS)组，

分为3、6、12和24h四个观察组(每组均10只)，分别给大鼠注射LPS(10mg／

kg)，间隔不同的时间后将大鼠放血活杀，取肺组织待测；(3)LPS+AngⅡ受体拮

抗剂组(10只)，先给予大鼠静注AngⅡ受体拮抗剂[sar1，Ile8]AngⅡ(20μg／kg)

处理，然后观察6h，放血活杀后取肺组织待测。分别以肺湿／干重比、伊文思

蓝法测定肺微血管通透性和肺组织病理变化，观察LPS对大鼠肺组织的急性损

伤作用以及AngU受体拮抗剂对该损伤作用的影响。结果与对照组比较，LPS

组各时相点大鼠肺组织W／D值显著升高(P＜0.01)，致大鼠肺血管中伊文思蓝

染料向组织中渗漏显著增多(P＜0.01)，LPS组出现炎性细胞浸润、水肿等损伤表

现，总病理评分达(12.00±2.45)分；LPS+AngⅡ受体拮抗剂组大鼠肺组织湿／干

重比、肺微血管蛋白渗出量和组织形态学变化均较LPS组显著好转。结论Ang

Ⅱ受体拮抗剂对大鼠内毒素性ALl有保护作用。

标签：血管紧张素Ⅱ；受体拮抗剂；内毒素；大鼠；肺损伤

急性肺损伤(ALI)是全身炎性反应综合征在肺部的表现，其本质为肺微血管

通透性升高所致的一种血管渗漏综合征。研究证实，一方面内毒素可造成肺微血

管内皮细胞(pulmonarymicrovascularendothelia1cell，PMVEc)损伤，另一方面激

活的PMVEC在肺局部炎症反应中起积极主动作用，它分泌一些炎症因子及血管

活性物质，参与并放大肺局部炎症效应，导致肺内皮通透性增加，致通气／血流

比值失衡和肺间质及肺泡水肿，低氧血症，最终导致ALI。

G-菌感染时全身及局部的肾素-血管紧张素系统(RAS)激活，可致循環及组织

局部的AngII浓度升高，但升高的AngⅡ在ALI发生过程中对肺内皮通透屏障

究竟产生何种影响，其与G-菌内毒素之间的相互作用如何，鲜见报道。

本研究拟在建立LPS诱导大鼠ALl模型的基础上，观察LPS诱导ALI损伤

指标的变化以及AngII受体拮抗剂对LPS致伤作用的影响。

1材料与方法

1．1主要仪器与试剂

日立-850型荧光分光光度计：日本。BD-211电子天平：SATORIOUS，德国。

电热恒温水浴锅：上海市医疗器械五厂。电热真空干燥箱：ZK-82A型，中国。

大肠杆菌脂多糖(LPS)血清型(0111：B4)，[sar1，Ile8]AngⅡ，均为美国Sigma公

司产品。氯胺酮：上海第一生化药业有限公司。伊文思蓝染料(Evansbluedve，

EBD)：美国Fluke公司产品。

1．2模型制作及试验分组

参照路国华等和徐智等方法并加以改进。取Wistar大鼠60只，(安徽医科大

学动物中心提供)雌雄不拘，随机分为三组：(1)正常对照组(10只)；(2)LPS组，

又分为3、6、12和24h四个观察组(每组均10只)；(3)LPS＋AngII受体拮抗剂

组(10只)。自制鼠笼固定大鼠，自尾静脉注射LPS(10mg／kg)；腹腔内注射氯胺

酮(20mg／kg)麻醉；切断双侧颈动脉放血活杀；以0.9％生理盐水50ml灌注右

室直至流出的液体变清亮；迅速将肺脏取出。对照组注射等量生理盐水。LPS＋

AngⅡ受体拮抗剂组，先予大鼠静注『Sar1，Ile8]AngⅡ(20μg／kg)处理，观察

6h后，将大鼠放血活杀取肺组织待测。

1．3观察指标与测定方法

(1)肺湿／干重比测定大鼠接受静脉注射后，回鼠笼自由活动，注射完毕开

始计时，致伤前和致伤后3、6、12和24h点采样。取左肺，尽量放出肺血管内

残血，清洗肺组织；左肺组织称量湿重；置真空干燥箱，80℃脱水72h至重量

不再变化；烤干后的肺组织称量干重。以肺湿／干重比值(W，D)表示肺组织含

水量。(2)伊文思蓝法测定肺微血管通透性分别取0.1％EBD标准品0、