高效抗肿瘤γ型干扰素突变体的制法和用途.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1109507A

(43)申请公布日1995.10.04

(21)申请号C2

(22)申请日1994.09.06

(71)申请人中国预防医学科学院病毒学研究所

地址100052北京市宣武区迎新街100号

(72)发明人侯云德王晓鸣陈望秋丁炎平

(74)专利代理机构

代理人

(51)Int.CI

C12N15/23

C12N15/63

C12N15/62

C12P21/02

A61K48/00

A61K38/21

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

高效抗肿瘤γ型干扰素突变体的制

法和用途

(57)摘要

采用基因工程技术构建一类新型、

高效的抗肿

瘤、抗病毒药物。它是由C端缺失11个氨

基酸的人

γ型干扰素通过中间连接肽与痘苗病毒生长

因子第

三环进行连接的融合蛋白(HuIFN-γ-

VVGFC)。

它兼有人γ型干扰素的抗病毒活性、与

EGF受体结

合活性、增强的抗肿瘤细胞增殖活性。同

法构建的

MuIFN-γ-EGFC对小鼠黑色素瘤有更强的

抑瘤作

用。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1、采用DNA重组技术人工构建C端缺失11个以下氨基酸的人γ型干扰素基因及

用人工生物体系(大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞等)制备该干扰素突变体用于治

疗肿瘤和/或病毒性疾病。这一突变体的生物学活性高于其母体分子。

2、采用DNA重组技术，人工构建人γ型干扰素-EGFC环融合蛋白。人γ干扰素

的C端可以缺失几个至11个;连接肽以Gly为核心;EGF包括其他EGF超家族成员

的分子第三环，第三环序列的非必需氨基酸可以替代。采用人工生物体系（大肠杆

菌、酵母菌、哺乳动物细胞等）制备该融合蛋白用于治疗肿瘤和/或病毒性疾病。

3、采用DNA重组技术，人工构建小鼠γ型干扰素-mEGFC环融合蛋白。小鼠γ

干扰素的C端可以缺失KRKRS下游几个氨基酸;连接肽以Gly为核心;EGF分子第

三环序列的非必需氨基酸可以替代。采用人工生物体系（大肠杆菌、酵母菌、哺乳

动物细胞等）制备该融合蛋白用于实验肿瘤学的研究。

4、其他与γ干扰素有类似功能的细胞素通过以Gly为核心的连接肽与EGFC环

连接构建融合蛋白用于肿瘤/病毒病治疗。

说明书

p本发明涉及一类人工设计构建的新型、高效的抗肿瘤药物--人γ型干扰素-表皮

生长因子受体结合域融合蛋白的制作技术及其用途。这类突变体与母体分子比较，

具有活性高、特异性强的优点。

干扰素是一类重要的细胞素，它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、抗细胞分裂、

免疫调节等多种生物学活性。经10多年临床应用研究表明，它是一种重要的抗病

毒、抗肿瘤治疗药物。迄今所知，人、小鼠、牛、马等哺乳动物的干扰素均有α、

β、γ等三个型别。其中γ型干扰素具有较强的免疫调节活性，所以又称免疫干扰

素。但是，临床治疗肿瘤的疗效却不如α型干扰素明显。

成熟的人γ型干扰素由143个氨基酸组成;含有较丰富的碱性氨基酸残基，其C末

端有一多价阳离子区RKRKRS，C末端易受蛋白酶的降解而使C端不均一。人γ

型干扰素的C端可缺失11个氨基酸，而其抗病毒活性不受影响。γ干扰素的活性

型为二聚体。

许多肿瘤细胞表面富有表皮生长因子受体（EGFR），它的配体除表皮生长因子

（EGF）外，还包括α转化生长因子（TGF-α），痘苗病毒生长因子（VGF），

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