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玉米麸皮多糖对人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用
徐伟丽;崔鹏举;鲁兆新;张兰威
【摘要】为明确不同提取方法获得的玉米麸皮多糖对人结肠癌HT-29细胞增殖的
抑制作用,采用MTr、倒置显微镜观察、分裂指数、集落形成方法测定细胞活
力.MTT实验结果表明,水提玉米麸皮多糖可抑制结肠癌HT-29细胞的生长,随质量
浓度和处理时间的增加细胞抑制率增加,0.02g/L的多糖处理48h其抑制率可达
60.62%.另外两种多糖对HT-29细胞无明显的抑制效果.形态学观察结果表明,水提
玉米麸皮多糖作用48h,HT-29细胞有明显的形态学改变.同时,水提玉米麸皮多糖
能够抑制HT-29细胞有丝分裂数和集落形成率,并呈时间和剂量效应.
【期刊名称】《哈尔滨工业大学学报》
【年(卷),期】2015(047)002
【总页数】5页(P62-66)
【关键词】玉米麸皮;多糖;抗肿瘤;HT-29细胞
【作者】徐伟丽;崔鹏举;鲁兆新;张兰威
【作者单位】哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,150090哈尔滨;哈尔滨工业大
学食品科学与工程学院,150090哈尔滨;哈尔滨工业大学食品科学与工程学
院,150090哈尔滨;哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,150090哈尔滨
【正文语种】中文
【中图分类】TS241
玉米生产加工过程中会产生大量的副产物玉米麸皮,其得率约为玉米原料量的
10%~15%.因此,由玉米麸皮制备的多糖备受关注.目前,对于玉米麸皮多糖的研
究主要集中于制备方法、降血糖、减肥降脂、抗便秘作用等[1-4].有研究表明玉
米皮多糖还可作为治疗结肠癌的辅助手段[1],但是还不清楚其确切的分子机制.
本研究探讨了玉米麸皮多糖体外对结肠癌HT-29细胞的抑制作用,为进行下一步
的机制研究提供实验依据,为开发肿瘤化学预防剂和保健食品的新资源奠定了理论
基础.同时,促进了玉米加工副产物的深度开发利用,对于合理利用粮食资源、全
面提高玉米加工产业的社会及经济效益有重要意义.
1实验
1.1实验材料
人结肠癌HT-29细胞购自协和医科大学基础所细胞中心.玉米麸皮多糖:以玉米麸皮
为原料,采用超临界方法去除玉米麸皮中的油脂,采用淀粉酶、蛋白酶去除玉米麸
皮中的淀粉、蛋白质.以水为提取溶剂,提取玉米麸皮多糖,滤液低温减压浓缩,
醇沉,得水提玉米麸皮多糖.以水提后的水不溶物为原料,分别采用碱液和碱性过
氧化氢溶液为提取剂,中和滤液,低温减压浓缩,醇沉,得碱提玉米麸皮多糖和碱
性H2O2提玉米麸皮多糖.
1.2实验试剂
四氮唑蓝(MTT)、RNA酶、HEPES、DMSO、丙烯酰胺(SigmaAldrich,美国);L-
谷氨酰胺(原平皓公司,中国);RPMI1640培养基、小牛血清(Gibco公司,美
国);GiemsaStain(Amresco,美国);其余试剂均为分析纯.
1.3实验仪器
LaboAutoCLAve高压灭菌器、ProgramOven干热灭菌箱,日本SANYO公
司;IX70倒置显微镜,日本Olympus公司;ELX800酶标仪,Bio-Tek公
司;MODEL5410CO2培养箱,NAPCO公司.
1.4细胞培养和处理
HT-29细胞在含有1%谷氨酰胺、10%胎牛血清的RPMI1640完全培养液中,于
37℃、5%的CO2培养箱中常规培养,用0.02%EDTA/0.25%胰酶消化后进行传
代,取对数增殖期的细胞用于实验.
对3种方法得到的玉米麸皮粗多糖(水提、碱提和碱性H2O2提玉米麸皮多糖)进
行体外抗肿瘤作用研究.将多糖用改良型RPMI-1640培养液分别配制成10g/L的
溶液,0.22μm滤膜过滤除菌,密封并于-20℃下保存,备用,使用时用培养基稀
释到所需质量浓度.根据预实验结果确定用于培养人结肠癌HT-29细胞的水提玉米
麸皮多糖为0.01,0.02,0.03,0.04,0.05,0.10g/L6个剂量组,碱提和碱性
H2O2提玉米麸皮多糖为0.02,0.10,0.50,2.50,10.00g/L5个剂量组,肿瘤
细胞加培养液为对照组.
1.
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