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牙龈卟啉单胞菌临床菌株的分离、鉴定及生长特性分析

李云鹏;刘大力;束蓉;周彦玢

【摘要】目的对口腔中牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)进行分离和鉴定,初步分析

P.gingivalis的生长特性.方法采集慢性牙周炎患者和牙周健康者临床龈下菌斑标

本并行厌氧培养,采用PCR和16SrDNA序列分析方法鉴定P.gingivalis,分析检出

率；观察P.gingivalis临床菌株的菌落特征和生长特点,分析生物学特征.结果从

35名采样对象的146个龈下菌斑标本中分离获得6株P.gingivalis临床菌株,分别

命名为L2、L3、L4、L5、L11、和L12；牙周健康者龈下菌斑中P.gingivalis的

检出率为27.4％,慢性牙周炎患者的牙周健康部位的龈下菌斑中P.gingivalis检出

率为86.7％,探诊深度为4～6mm的牙周袋龈下菌斑中P.gingivalis检出率为

95.6％,探诊深度＞6mm的牙周袋龈下菌斑中P.gingivalis检出率为96.0％.L2、

L5、L11和L12在BHI平板上培养1周后均形成特征性黑色菌落,而L3和L4在培

养1周后形成灰色菌落,10d后形成特征性黑色菌落；L2、L4、L5和L12在传代

30h后进入对数期生长期,L3和L11则在传代60h后进入对数生长期.结论

P.gingivalis是慢性牙周炎患者的优势致病菌之一,其在慢性牙周炎患者健康位点的

检出率显著高于牙周健康者,且随着牙周探诊深度的加深,检出率呈现逐渐升高的趋

势.P.gingivalis各临床菌株的生长存在差异,提示其生物学特征和致病性可能不

同.%ObjectiveToisolateandidentifyPorphyromonasgingivalis(P.

Gingivalis)fromclinicalsubjects,andanalysethegrowthcharacteristicsof

P.Gingivalis.MethodsSubgingivalplaquesampleswerecollectedfrom

patientswithchronicperiodontitisandperiodontallyhealthysubjects,and

anaerobicculturewasperformed.P.Gingivalisstrainswereidentifiedby

PCRand16SrDNAsequencing,anddetectionratewasanalysed.Bacteria

coloniesandgrowthcharacteristicsoftheclinicalstrainsofP.Gingivalis

wereobserved,andthebiologicalpropertieswereanalysed.ResultsSixP.

GingivalisclinicalstrainsnamedasL2,13,L4,LS,L11andL12wereisolated

from146subgingivalplaquesamplescollectedfrom35subjects.The

detectionrateofP.Gingivaliswas27.4%insubgingivalplaquesamplesof

periodontallyhealthysubjects,86.7%inperiodontallyhealthysitesof

patientswithchronicperiodontitis,95.6%inperiodontalpocketswith

probingdepthof4-6mm,and96.0%inperiodontalpocketswithprobing

depth6mm.Strains12,L5,L11andL12formedblackcoloniesonBHI

platesafterculturefor1week.Strains13andL4formedgreycolonies1

weekafterculturefor