致泻大肠埃希氏菌肠出血性大肠杆菌O157-:H7.pptVIP

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致泻大肠埃希氏菌肠出血性大肠杆菌O157:H7;;一概念及分类地位;一概念及分类地位;一概念及分类地位;二生物学特性;三卫生学意义;;;四检测方法;1致泻大肠埃希氏菌(经典培养生化鉴定法)

1.1增菌

1.2分离

1.3生化试验

1.4血清学试验

1.5肠毒素试验(略)

1.6结果报告;1致泻大肠埃希氏菌(经典培养生化鉴定法)

1.1增菌

以无菌操作取检样25g(mL),加在225mL营养肉汤中,均质,取出适量,接种乳糖胆盐培养基,以测定大肠菌群MPN,其余的移入500mL广口瓶内,于36℃±1℃培养6h。挑取1环,接种于1管30mL肠道菌增菌肉汤内,于42℃培养18h。

1.2分离

将乳糖发酵阳性的乳糖胆盐发酵管和增菌液分别划线接种麦康凯或伊红美蓝琼脂平板;污染严重的检样,可将检样匀液直接划线接种麦康凯或伊红美蓝平板,于36℃±1℃培养18h~24h,观察菌落。不但要注意乳糖发酵的菌落,同时也要注意乳糖不发酵和迟缓发酵的菌落。

1.3生化试验

(1)接种三糖铁琼脂(TSI)或克氏双糖铁琼脂(KI)、蛋白胨水、半固体、pH7.2尿素琼脂、KCN肉汤和赖氨酸脱羧酶,在36℃培养过夜。

(2)TSI斜面产酸或不产酸,底层产酸,H2S阴性,KCN阴性和尿素阴性的培养物为大肠埃希氏菌。TSI底层不产酸,或H2S、KCN、尿素有任一项为阳性的培养物,均非大肠埃希氏菌。必要时做氧化酶试验和革兰氏染色。;1致泻大肠埃希氏菌(经典培养生化鉴定法);2肠出血性大肠杆菌O157:H7(经典培养生化鉴定法);;;;;;;;;;;祝大家工作顺心如意

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