假病毒真本领,助力疫苗开发、病毒学研究、中和抗体筛选.pdf

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假病毒真本领,助力疫苗开发、病毒学研究、

中和抗体筛选

许多能够引起人类疾病的病毒属于包膜病毒,如新冠病毒、猴痘病毒、

流感病毒、埃博拉病毒、狂犬病毒、基孔肯雅病毒等。这些病毒株的

获得是一个复杂耗时的过程,且危险性高,需要在生物安全3级或4

级实验室进行,严重限制了研究、预防和治疗效率。

假病毒(Pseudovirus)技术的出现解决了这些难题。假病毒基于包

膜蛋白构建,不需要分离培养活病毒,且只能复制一次,可在BSL-2

实验室操作。假病毒含有报告基因,能够模拟天然包膜病毒的表面特

征,易于定量分析。

根据核心基因组来源,假病毒可以分为3类:HIV-1基因组、VSV基

因组和MLV基因组。假病毒在体外完成核心基因组和包膜蛋白的组装,

通过质粒或稳定表达的细胞系表达包膜蛋白,用于感染靶细胞,模拟

活病毒感染过程。

不同假病毒获取示意图(源自文献:doi:10.1016/j.micres.2022.126993)

假病毒已成为病毒学研究中的重要工具之一。义翘神州已成功开发一

系列高品质假病毒产品,覆盖SARS-CoV-2、MERS、流感等多种病毒,

广泛应用于病毒感染机制研究、血清中和抗体检测以及疫苗效价评估、

抗病毒药物筛选和评价等研究。

01病毒感染机制研究

众所周知,ACE2是SARS-COV-2的关键受体。但是在不表达ACE2的

器官中也能检测到该病毒,表明可能存在其他受体或共受体介导病毒

感染。中国科学院昆明动物研究所赖仞团队联合多个研究团队发现转

铁蛋白受体(TfR)直接与病毒刺突蛋白高亲和力结合,是另一种介

导SARS-COV-2感染的受体。Omicron假病毒证实过表达TfR和ACE2

的细胞感染率更高。

用SARS-COV-2原始毒株和Omicron突变假病毒(货号:PSV017)感

染过表达人TfR和ACE2的BHK-21细胞,结果显示Omicron感染率更

高。

(源自文献:doi:10.1073/pnas.2317026121)

02中和抗体检测

清华大学向宇研究团队通过对RBD的核酸适配体进行修饰,筛选获得

一种阻断RBD-ACE2结合的共价化合物。此化合物通过与RBD形成共

价键来中和SRAS-COV-2假病毒感染,使假病毒中和效应比对照高25

倍以上。研究证实利用共价抑制机制开发新冠抑制剂抗病毒药物潜力

巨大。

单克隆抗体和共价核酸适配体6C3-7SF、6C3、6C3-7PS的假病毒(货

号:PSV001)中和活性检测结果

(源自文献:doi:10.26434/chemrxiv-2021-nd0r2-v2)

03疫苗免疫效果的评价

上海交通大学崔大祥团队为提高亚单位疫苗免疫原性,研制了一种新

型疫苗佐剂体系,获得氧化石墨烯复合佐剂纳米疫苗(GCR)及微针

贴片疫苗(MGCR)。假病毒(货号:PSV001)中和血清检测数据显示

接种第2针疫苗后,GCR新型疫苗中和效果更好。

接种GCR疫苗小鼠血清的假病毒中和活性

(源自文献:doi:10.7150/thno.83390)

04抗病毒药物筛选

徐州医科大学的郑骏年、白津团队首次发现PRMT5特异性抑制剂

GSK3368595(全球临床研究已进入Ⅱ期)能够明显抑制新冠病毒刺突

蛋白与ACE2受体结合,抑制病毒感染宿主细胞。本研究通过设置抑

制剂浓度、敲低或过表达PRMT5,检测新冠假病毒(货号:PSV001)

感染过表达ACE2的HEK-293T或A549细胞,结果显示GSK3368595能

够抑制新冠假病毒感染。

GSK3368595抑制假病毒感染的实验结果图

(源自文献:doi:10.1002/jmv.28158)

义翘神州假病毒产品及中和检测服务

产品优势

★滴度高:

≥105TCID50/mL,侵染细胞后Luciferase发光值达106RLU

★真实性好:

采用HIV-1框架,表面表达病毒入侵细胞关键蛋白,可模拟真病毒侵

染细胞机制

★安全性强:

仅可一次性感染细胞,无自主复制能力、无致病性

★验证全:

多样本验证(血清、中和抗体),与真病毒检测结果吻合度高

★稳定性强:

质控方法可靠,批次间稳定,可以长期稳定制备和供应

❖客户评价

客户使用产品:

客户使用产品信息

SARS-CoV-2(D614G)SpikePseudovirus(Cat#:PS

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