实验一可溶性还原性糖、脂肪和蛋白质的检测课件.pptVIP

实验一可溶性还原糖、

脂肪、蛋白质的鉴定

一、实验原理

水浴加

热

斐林试剂砖红色沉淀

v可溶性还原糖＋

颜可溶性还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖

色（蔗糖、淀粉都没有还原性）

反苏丹Ⅲ染液

应橘黄色

v脂肪＋

苏丹Ⅳ染液红色

v蛋白质双缩脲试剂紫色

＋

二、几种重要的试剂

甲液（0.1g/mL的NaOH溶液）

v斐林现配现用

试剂等量

乙液（0.05g/mL的CuSO溶液）

4混合均匀

A液（0.1g/mL的NaOH溶液）现配现用

v双缩脲先加A液

试剂再加B液

B液（0.01g/mL的CuSO4溶液）

四、实验方法与步骤

v1、可溶性还原糖的鉴定

(1)制备组织样液：苹果洗净、去皮、切块→

取5g加少许石英砂研磨→加5mL水再研磨→漏

斗垫纱布后过滤，得到样液

(2)鉴定样液：取2mL样液于试管中→注入2mL

刚配制的斐林试剂，振荡混合（淡蓝色）→

水浴煮沸2min左右，观察溶液颜色变化（先变

为棕色，再变为砖红色）

v2、脂肪的鉴定

(1)切片制作

(2)染色：在花生子叶切片上滴2～3滴苏丹Ⅲ

染液→2～3min中后，吸去染液→滴体积分数

为50％的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精，再

滴1～2滴蒸馏水，盖上盖玻片

(3)镜检鉴定：在低倍物镜下观察，找到花生

子叶切片的最薄处，移至视野中央→转动转换

器，换用高倍物镜观察（脂肪滴:橘黄色的圆

形小颗粒）

v3、蛋白质的鉴定

(1)制备组织样液：浸泡黄豆1～2d→去皮、切成薄片，

加少许石英砂及5mL水研磨→漏斗垫纱布后过滤，得

到样液（用蛋清要稀释10倍以上，否则实验后黏住试

管壁不易洗净）

(2)鉴定样液：取2mL样液于试管Ⅰ中→加入2mL双缩

脲试剂A液摇匀（造成一个碱性环境）→加入双缩脲

试剂B液3～4滴，摇匀，注意颜色变化（溶液变为紫

色）。

五、注意事项

v良好的实验材料是实验成功的一半

v斐林试剂和双缩脲试剂的配制、使用方法和

用途。

v脂肪的鉴定，把化学反应和显微镜观察结合

起来，也称为显微化学反应。