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基因工程
[基础巩固练]——学业水平一、二
1.下列关于基因工程的叙述,错误的是()
A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B.限制性内切核酸酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
2.在DNA的粗提取试验中,对DNA提取量影响较小的是()
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分裂开并释放出DNA等核物质
B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,直至黏稠物不再增多
D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可将混合液再放入冰箱中冷却
[提能强化练]——学业水平三、四
3.[经典高考]北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列,该序列重复次数越多,抗冻实力越强,下图是获得转基因抗冻番茄植株的过程示意图,有关叙述正确的是()
A.过程①获得的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B.将多个抗冻基因编码区依次相连形成能表达的新基因,不能得到抗冻性增加的抗冻蛋白
C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因,须要转入农杆菌才能进行筛选
D.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
4.[2024·天津一中高三月考]为提高大豆对磷元素的汲取实力,探讨人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中,下图为重组Ti质粒上T-DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是()
A.以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因
B.RNA聚合酶与启动子1识别并结合后,启动抗除草剂基因的转录
C.可通过含除草剂的选择培育基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织
D.用EcoRⅠ、BamHⅠ酶同时切重组Ti质粒后,经电泳分别至少得到两条不同长度的带
5.
(多选)如图为某种质粒的简图,小箭头所指分别为限制性内切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述不正确的是()
A.将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切,在DNA连接酶作用下,生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种
B.DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来,形成一个重组质粒时形成两个磷酸二酯键
C.为了防止目的基因反向连接和质粒自行环化,酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ
D.受体细胞能在含青霉素的培育基中生长,表明该目的基因已胜利导入该细胞
6.(多选)依据某基因上游和下游的碱基序列,设计合成了该基因的两段引物(单链DNA)。引物与该基因变性DNA(单链DNA)结合为双链DNA的过程称为复性。如图是两引物的Tm(引物熔解温度,即50%的引物与其互补序列形成双链DNA分子时的温度)测定结果,下列叙述正确的是()
A.通常引物1和引物2不能有碱基互补配对关系
B.两引物分别是子链延长的起点,并可以反复利用
C.若两引物的脱氧核苷酸数相同,则可推想引物2的GC含量较高
D.复性所需温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度等因素
[大题冲关练]——综合创新·求突破
7.[2024·江苏省常熟市高三阶段抽测]新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT—PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA逆转录出cDNA,并大量扩增,时,用荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA。请回答下列问题:
(1)“荧光RT—PCR技术”所用的试剂盒中通常都应当含有:____________、____________________、荧光标记的核酸探针、引物、dNTP、缓冲体系。
(2)假如要同时扩增两种基因,则试剂盒中的引物应当有________种。下图为新冠病毒的“ORFlab基因”对应的cDNA片段结构示意图,则与之对应的引物结合的部位应当是图中的________(子链延长方向为其自身的5′→3′,用图中数字作答)。若已知该基因的引物I,能否依据其碱基序列设计出另一种引物Ⅱ?________,理由是________________________________________。
(3)在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度的变更监测产物量的变更从而得到一条荧光扩增曲线图(如下图)。
①“平台期”出现的最可能的缘由是________________________________________________________________________
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