实验2-毛细血管采血-WBC计数课件.pptVIP

临床检验学实验课

实验二毛细血管采血（Collectionofcapillaryblood)

白细胞计数(Whitebloodcell)

实验二[要求]1、掌握毛细血管采血的方法,了解不同部位采血对检验结果的影响；2、掌握显微镜WBC计数的原理和方法；3、熟悉WBC增高和减少的临床意义。

器材与试剂[器材]一次性消毒采血针、一次性微量吸管、小试管、75％（V／V）乙醇棉球、无菌干棉球。[试剂]白细胞稀释液（2％冰醋酸中加入10g/L结晶紫或亚甲兰3滴）

操作1、实验准备3、消毒，待干2、按摩左手食指或中指4、针刺（深度2-3mm）5、拭血（第一滴血）7、稀释（擦去吸管外余血、冲洗次2-3次）返回6、吸血（20ul）

注意事项1、采血部位皮肤应完整，无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。除特殊情况外，不要在耳垂采血。半岁以下婴幼儿由于手指小，可自拇指、脚趾或足跟内、外侧缘采血；严重烧伤者可选皮肤完整处采血2、必须严格按无菌技术操作，防止采血部位感染；做到一人一针一管，避免交叉感染，

注意事项4、第1滴血混有组织液，应擦去。如血流不畅切勿用力挤压，以免造成组织液混入，影响结果的准确性。5、在进行多项检查时，采集血液标本的顺序是PLT→RBC→Hb→WBC计数与分类。

原理用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。二、WBC计数

操作1、加稀释液0.38ml2、吸取血液20ul3、混匀、悬液变为棕褐色4、充池，静止2-3min5、计数（四角4个大方格）图示6、计算、出报告

注意事项1、充池时，如充液不足、液体外溢、断续充液，或产生气泡、充液后移动盖玻片等，均会使细胞分布不均匀，造成计数结果不准确，应重新充池。一般情况下各大方格间的细胞数相差不超过10％。若相差太大，应重新充池。2、白细胞数量过多时，可采用加大稀释倍数的方法。如20μl血加入到0.78ml稀释液中或10μl血加入到0.38ml稀释液中；数量过少时，可采用扩大计数域的方法，如计数8个或9个大方格；也可采用减少稀释倍数的方法

注意事项白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细胞计数结果偏高，此时应计算白细胞校正值（公式中的有核红细胞是指分类100个白细胞时所遇见的有核红细胞）WBC校正值／L＝返回100.100+有核RBC×校正前WBC数

方法学评价手工血液分析仪优点简便易行、不需昂贵仪器，可用于血液分析仪器的校准精密度和准确性较高、易于标准化、适合大规模健康人群普查缺点精密度和重复性欠佳仪器昂贵、某些人为或病理情况（有核RBC、大PLT等)可干扰计数

本次实验顺序2、按摩、消毒、针刺1、准备微量吸管和加WBC稀释液至试管内4、准备计数池盖玻片3、用微量吸管分别吸取血20ul于WBC稀释液试管内5、混匀WBC悬液后滴入计数盘中6、2-3min后计数、计算、出报告

复习题1、在进行毛细血管采血时应注意什么？2、WBC计数的计数的区域、计数原则和计算公式是什么？3、WBC增高和减低的临床意义是什么？