大鼠原位肾脏移植模型.pdfVIP

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大鼠肾移植模型制作

大鼠肾移植模型目前仍是肾移植实验研究中非常有价值和常用的动

物模型。这一模型具有许多优点:显微外科技术的应用使建立稳定可

靠的实验动物模型成为可能;大鼠繁殖快,成本较低;有大批基因型

明确的纯系大鼠供选择如SD大鼠、Wistar大鼠等。这一术式的基

本方法如下。

一、手术器械

显微外科手术器械包,手术显微镜1台,自制S拉钩(用橡皮筋一

端带弯成S形大头针)4个,眼科剪1把,其它外科器械若干及纱

布、棉球、棉片和橡皮条等。

二、实验动物及麻醉

根据实验目的选择同一品系或不同品系的大鼠,一般8~10周龄,

体重150~250g,供鼠雌雄不限,受鼠最好为雄性大鼠,供受者

体重相仿。腹腔注射0.3%戊巴比妥2ml/100g或氯胺酮

10mg/100g体重或已醚吸入麻醉均可。

三、供肾切取术

腹部正中切口,切开皮肤、腹直肌和腹膜,充分暴露左肾,以湿纱布

覆盖周围组织器官。

1.供肾血管游离:使用棉签和无齿眼科镊钝性分离左肾动静脉及其分

支,游离与其连接的腹主动脉和下腔静脉,结扎肾上腺动、静脉。在

游离完毕的左肾动脉上方和右肾动脉下方的腹主动脉部和腹主动脉

远端及左肾静脉上下方的下腔静脉各以1号细丝线围绕,勿结扎。

2.左肾原位灌洗:以Lee氏夹阻断左肾动脉下方的腹主动脉血流,

以血管钳夹闭腹主动脉和下腔静脉远端,在肾动脉以下的腹主动脉上

切一小口插管,注入500u/ml肝素等渗盐水2ml使全身肝素化,

然后相继结扎左肾动脉以上的腹主动脉和左肾静脉以下的下腔静脉,

在左右肾静脉开口之间剪断下腔静脉,进行低温灌洗。用4℃等渗盐

水10ml/min自腹主动脉插管处推注,灌洗5分钟,见左肾和附

属血管完全苍白,停止灌注。

3.输尿管、膀胱分离:以小弯蚊式钳轻轻提起膀胱底,钝性分离膀胱

和输尿管,并逐渐延伸至左肾门,注意适当保留部分输尿管周结缔组

织(其内有输尿管滋养血管),整块剪下左肾肾血管、灌洗段腹主动

脉和下腔静脉、左输尿管及膀胱,立即置入4℃平衡盐溶液中保存。

4.供肾处理:4℃平衡盐溶液冰浴中修剪供肾血管、输尿管和膀胱。

把连接肾动脉的腹主动脉修剪成一3×2mm2的椭圆形动脉瓣,并

将连接左输尿管的膀胱亦修剪成直径3mm的膀胱瓣。

四、供肾原位移植术

受者麻醉后,将肠管推向右侧,湿纱布保护内脏器官和周围组织,用

自制拉钩牵引暴露左肾及其周围组织。

1.受者血管游离:如前述钝性分离左肾动、静脉及其分支,并分离此

处下腔静脉、腹主动脉和左输尿管肾门端,仔细除去左肾动脉根部腹

主动脉血管外结缔组织,并结扎此处腹主动脉分支。用眼科剪锐性分

离左肾,4号丝线结扎肾动、静脉远心端和左输尿管肾门部,将连有

左肾动脉根部的腹主动脉完全分离,小心去除血管外结缔组织,并结

扎此处分支血管。

2.重建血管:将供肾置于腹部切口左侧缘,医用冰棉片覆盖供肾,术

中若发现冰屑融化,需不断补充。在分离好的腹主动脉上下方各置一

Lee氏夹,阻断腹主动脉血流,结扎并剪掉左肾动脉残端,在此处制

备与供肾动脉瓣一致的纵行切口,肝素(25IU/ml)生理盐水冲洗

管腔内残余血,用连续缝合法端-侧缝合腹主动脉瓣与受者腹主动脉

纵行切口;肾静脉口径较大,可在显微镜下做供受者之间肾静脉端-

端吻合。动静脉吻合完毕,同时松开远近端血管夹,开放血流,移植

肾色泽逐渐红润,明亮,肾动脉搏动明显,肾静脉充盈,表示血运顺

畅。如有漏血,以棉球轻压片刻,即可止血。血供好的供肾可见输尿

管开口处尿液逐渐流出,输尿管营养血管供血良好。

3.尿路重建:观察供肾血运良好后,即行输尿管膀胱瓣和受者膀胱吻

合术。常规采用端-端吻合或端-端套管吻合及带膀胱瓣的端-侧吻

合,现多采用后一术式。在受者膀胱顶部剪一直径2.5cm切口,调

整好供肾输尿管位置,勿扭曲,以6-0无损伤缝线间断全层缝合,

完成后再次检查供者输尿管是否扭曲。移植术毕,缝合腹壁切口。

输尿管膀胱瓣与受者膀胱吻合示意图

受者自体肾切除:多主张择期手术,术后3天即可切除自体右肾。

其它肾血管重建方式:主要为袖

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