样品保存剂及配制方法.pdfVIP

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附表1

样品保存剂及配制方法

A.1阿氏液(Alsevers)

葡萄糖2.05g

柠檬酸钠(NaCHO·2HO)0.80g

36572

柠檬酸0.055g

氯化钠0.42g

加蒸馏水至100mL,溶解后调pH至6.1后分装,70kPa15min灭

菌,冷却后4℃冰箱中保存备用。

A.230%甘油盐水缓冲液

甘油30mL

氯化钠(NaCL)4.2g

磷酸二氢钾(KHPO)1.0g

24

磷酸氢二钾(KHPO)3.1g

24

0.02%酚红1.5mL

蒸馏水(或无离子水)加至100mL

加热溶化,校正pH值为7.6,100kPa15min灭菌,冷却后4℃

冰箱中保存备用。

A.3肉汤

牛肉膏3.5g

蛋白胨10g

氯化钠(NaCL)5g

充分混合后,加热溶解,校正pH值为7.2~7.4,用流通蒸气

加热30min,滤纸过滤,获蒿黄色透明液体,分装于试管或烧瓶中,

以100kPa20min灭菌,冷却后4℃冰箱中保存备用。

A.4pH7.4的等渗磷酸盐缓冲液(PBS)

氯化钠(NaCL)8.0g

磷酸二氢钾(KHPO)0.2g

24

磷酸氢二钠(NaHPO·12HO)2.9g

242

氯化钾(KCL)0.2g

将上列试剂按次序加入定量容器中,加适量蒸馏水溶解后,再

定容至1000mL,调pH值至7.4,高压消毒灭菌112Kpa20min,冷

却后,保存于4℃冰箱中备用。

A.5棉拭子用抗生素PBS(病毒保存液)的配制

取上述PBS液,按要求加入下列抗生素:喉气管拭子用PBS

液中加入青霉素(2000IU/mL)、链霉素(2mg/mL)、丁胺卡那霉素

(1000IU/mL)、制霉菌素(1000IU/mL)。粪便和泄殖腔拭子所用

PBS中抗生素浓度应提高5倍。加入抗生素后应调pH值至7.4。采

样前分装小塑料离心管,每管中加PBS1.0~1.3mL,采粪便时在

西林瓶中加PBS1.0~1.5mL,采样前冷冻保存。

附表2动物组织(拭子)采样单

组织免疫情况采样地点

动物种(蛋)日耳标健康市场样品

样品

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