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附表1
样品保存剂及配制方法
A.1阿氏液(Alsevers)
葡萄糖2.05g
柠檬酸钠(NaCHO·2HO)0.80g
36572
柠檬酸0.055g
氯化钠0.42g
加蒸馏水至100mL,溶解后调pH至6.1后分装,70kPa15min灭
菌,冷却后4℃冰箱中保存备用。
A.230%甘油盐水缓冲液
甘油30mL
氯化钠(NaCL)4.2g
磷酸二氢钾(KHPO)1.0g
24
磷酸氢二钾(KHPO)3.1g
24
0.02%酚红1.5mL
蒸馏水(或无离子水)加至100mL
加热溶化,校正pH值为7.6,100kPa15min灭菌,冷却后4℃
冰箱中保存备用。
A.3肉汤
牛肉膏3.5g
蛋白胨10g
氯化钠(NaCL)5g
充分混合后,加热溶解,校正pH值为7.2~7.4,用流通蒸气
加热30min,滤纸过滤,获蒿黄色透明液体,分装于试管或烧瓶中,
以100kPa20min灭菌,冷却后4℃冰箱中保存备用。
A.4pH7.4的等渗磷酸盐缓冲液(PBS)
氯化钠(NaCL)8.0g
磷酸二氢钾(KHPO)0.2g
24
磷酸氢二钠(NaHPO·12HO)2.9g
242
氯化钾(KCL)0.2g
将上列试剂按次序加入定量容器中,加适量蒸馏水溶解后,再
定容至1000mL,调pH值至7.4,高压消毒灭菌112Kpa20min,冷
却后,保存于4℃冰箱中备用。
A.5棉拭子用抗生素PBS(病毒保存液)的配制
取上述PBS液,按要求加入下列抗生素:喉气管拭子用PBS
液中加入青霉素(2000IU/mL)、链霉素(2mg/mL)、丁胺卡那霉素
(1000IU/mL)、制霉菌素(1000IU/mL)。粪便和泄殖腔拭子所用
PBS中抗生素浓度应提高5倍。加入抗生素后应调pH值至7.4。采
样前分装小塑料离心管,每管中加PBS1.0~1.3mL,采粪便时在
西林瓶中加PBS1.0~1.5mL,采样前冷冻保存。
附表2动物组织(拭子)采样单
组织免疫情况采样地点
动物种(蛋)日耳标健康市场样品
样品
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