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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN103865804A
(43)申请公布日2014.06.18
(21)申请号CN201410037538.X
(22)申请日2014.01.26
(71)申请人玉林师范学院
地址537000广西壮族自治区玉林市教育中路299号
(72)发明人苏龙覃荣燕区善芬许译中
(74)专利代理机构广西南宁公平专利事务所有限责任公司
代理人杨立华
(51)Int.CI
C12N1/14
C12P7/22
C12R1/69
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
β-葡萄糖苷酶高产菌及其在转化制
备白藜芦醇中的应用
(57)摘要
本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶高
产菌,系以虎杖为碳源从自然界中筛选
的,其保藏编号为CCTCC
NO.M2013633,分类命名为米曲霉
(Aspergillusoryzae)HHL,该菌能高效转
化白藜芦醇苷为白藜芦醇。据此,发明人
建立了一种利用上述β-葡萄糖苷酶高产菌
转化制备白藜芦醇的方法,一方面可在温
和条件下水解白藜芦醇苷,避免了传统方
法导致有效成分损失的缺陷,有效地提高
了产量;另一方面利用现代微生物发酵工
程技术和酶工程技术使虎杖的有效成分白
藜芦醇苷在体外可控条件下实现规模转
化,降低了生产成本,提高了生产效率。
本发明为大量工业化生产β-葡萄糖苷酶、
白藜芦醇提供了一条可行途径,具有较大
的经济效益和社会效益,市场开发前景广
阔。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
权利要求说明书
1.一种β-葡萄糖苷酶高产菌,其特征在于保藏编号为CCTCCNO.M2013633,分类
命名为米曲霉HHL。
2.权利要求1所述β-葡萄糖苷酶高产菌在转化制备白藜芦醇中的应用。
3.利用权利要求1所述β-葡萄糖苷酶高产菌转化制备白藜芦醇的方法,其特征在于
包括以下步骤:
(1)种子制备:将保存的米曲霉HHL孢子接种于斜面培养基上,置于35℃恒温
培养箱培养2天,获得孢子,用无菌水洗脱孢子获得孢子悬浮液,将孢子悬浮液接
入摇瓶发酵培养基;所述斜面培养基为查氏培养基;所述摇瓶发酵培养基是产酶优
化培养基;
(2)转化制备白藜芦醇:在温度为35℃、pH7.0、装液量为100ml/250ml、接种量
为1%、转速180r/min的条件下发酵120h,加入10%虎杖液,在温度为50℃、
pH5.0的条件下反应5h。
4.根据权利要求3所述利用β-葡萄糖苷酶高产菌转化制备白藜芦醇的方法,其特征
在于:所述孢子悬浮液浓度为1.0×10Sup8/Sup个/ml。
5.根据权利要求3所述利用β-葡萄糖苷酶高产菌转化制备白藜芦醇的方法,其特征
在于:所述虎杖液按以下操作制备:取10g虎杖按质量体积比1:10用蒸馏水浸泡
20分钟,然后煮沸30分钟,冷却后用8层纱布过滤,依法重复煮三次;合并滤液,
最后用蒸馏水定容至100ml,得虎杖煮提液。
6.根据权利要求3所述利用β-葡萄糖苷酶高产菌转化制备白藜芦醇的方法,其特征
在于:所述产酶优化培养基配方为麸皮汁10%、酵母膏0.5%、硫酸镁0.1%、磷酸
氢二钾0.1%、抗坏血酸0.1%。
说明书
技术领域
本发明属于微生物生物转化技术领域,尤其涉及一种β-葡萄糖苷酶高产菌及其在
转化制备白藜芦醇中的应用。
背景技术
白藜芦醇是中草药虎杖中的一种天然活性物质,化学名称为芪三酚(即3,5,4’-
三羟基-l,2一二苯基乙烯),是一种活性多酚物质,分子式为
CSub14/SubHSub
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