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1.临床诊疗与试验室诊疗试验室伎俩对狂犬病确实诊非常必要。WHO要求狂犬病病例统计上报资料要注明诊疗依据(是否包含试验室诊疗?)。当前国际上公认狂犬病死亡率是100%,标准上不认可有狂犬病康复可能,即狂犬病发病率应与死亡率相等。没有合格试验室给出必定诊疗康复病例应从狂犬病病例统计数字中剔除。“狂犬病患者必死无疑,不死不算狂犬病”,要挑战这个命题,必须提供确切、完整病史和权威试验室诊疗资料。新版狂犬病的实验室检测和诊疗技术第1页
2.人狂犬病生存期内诊疗生存期内诊疗技术选择主要伴随病程不一样而异。在病后最初几天,检测抗原普通是敏感。脑脊液及血清中病毒中和抗体经常趋向于在病后7—10天出现。检测抗原可用荧光抗体(FA)法检验狂犬病患者角膜印片或皮肤活组织,不过,FA阳性标本在发病后期更常见。皮肤活组织检验经常从颈背部取含有末稍神经带有毛囊标本。角膜印片(切勿划痕)取自伴有脑炎患者,用显微镜载波片轻轻触及角膜中心部位。角膜印片及皮肤活组织标本质量很主要,采取后应马上冷冻,直至检测。不过,用FA技术做生存期内诊疗,其敏感性是有限。新版狂犬病的实验室检测和诊疗技术第2页
人狂犬病生存期内诊疗已证实患者及自然感染和试验感染动物角膜印片中存在狂犬病抗原。不过,角膜印片检出率较低,阳性结果可必定是狂犬病,而阴性结果并不能排除是狂犬病可能。即使在临床症状开始时,在皮肤活组织中可能检出狂犬病抗原,但早期症状时仅有25-50%患者为阳性,伴随病情进展阳性率也增加。颈背部皮肤活组织检验只有一些患者呈阳性结果,尤其是在临床疾病早期。用FA检验皮肤活组织灵敏度普通高于检验角膜印片。新版狂犬病的实验室检测和诊疗技术第3页
3.动物和人狂犬病死后诊疗
抗原检测病毒分离病毒判定等。为了确保试验室结果可信性,必需满足若干条件:1.标本质量要好;2.标本送达试验室条件要好(符合GLP标准,取得一定级别资格认证);3.取得结果等候时间要短;4.结果传递要快速。新版狂犬病的实验室检测和诊疗技术第4页
二狂犬病诊疗试验室安全办法1.危险性在普通试验室条件,技术人员暴露于以下传染危险:——野生狂犬病毒(即街毒),当试验室对接收到动物标本进行尸体解剖时或对标本进行加工时(悬液制备,离心)等,这一类操作是非常危险,必须在P3以上条件专业试验室中进行。——试验室适应病毒(即固定毒),当接种试验动物或操作感染细胞培养时,尤其是制备大量高浓度病毒时,主要传染起源为手指被有感染玻璃或工具刺伤或割破;新糜烂皮肤或粘膜与感染物接触也应认为是一个传染危险。即使固定毒毒力已大为下降,历史上仅有一例死于固定毒操作报道,但仍有一定危险性,所以操作固定毒仍须十分小心。新版狂犬病的实验室检测和诊疗技术第5页
生物安全级别&对工作人员要求
(BiologicalSafetyLevel,BSL)(Protection,P)
BSL-1:试验人员在试验程序方面受过特殊训练,由受过微生物学或相关科学普通训练科学工作者监督试验。
BSL-2:试验人员均接收过病源处理方面特殊培训,并由有资格科学工作者指导。
BSL-3:试验人员应在处理致病性和可能使人致死病源方面受过专业训练,并由对该病源工作有经验、有资格科学工作者监督。
BSL-4:试验室组员应在处理尤其危险传染源方面受过特殊和全方面训练,应了解标准和特殊操作中一级和二级遏制作用、遏制设备、试验室设计性能。试验由在相关病源方面受过训练、并有工作经验、有资格科学工作者监督。新版狂犬病的实验室检测和诊疗技术第6页
2.对安全操作提议操作全部潜在狂犬病感染材料均应在P2或P3生物安全试验室内进行。对狂犬病试验室诊疗安全性要求:①一个封闭环境,专作狂犬病感染性工作②经过缓冲更衣间并限制一定专业人员进入;③穿专用试验室隔离无菌衣和鞋;④操作完成对操作台进行消毒(当材料偶然地溢出时应马上用3%雷苏尔溶液或其它对应消毒剂消毒);⑤每日应最少消毒地板一次;⑥全部用后剩下标本,尸解工具,试验室材料在拿出试验室前应进行高压蒸气消毒。在生物安全柜或隔离器内打开动物颅盖骨操作很困难,技术人员在操作这项工作时应带面罩,护目镜、手套和围裙。因为与狂犬病相关病毒对人致病性还不很了解,全部操作可能含有这些病毒标本均应在生物安全柜内进
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