实验2分离以尿素为氮源的微生物2课件.pptVIP

实验2分离以尿素为氮源的

一.实验原理尿素NH3中性碱性酚红颜色：(酸性)黄色红色(变色范围pH6.4-8.2)

二.实验目的使用以尿素为唯一氮源的培养基分离细菌(有脲酶)通过指示剂（酚红）颜色的变化检知培养基pH的变化(脲酶催化的化学反应)

配制培养基尿素培养基葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g琼脂糖0.5g酚红0.25g尿素10mlLB培养基蛋白胨：0.25g酵母提取液：0.12gNaCl：0.25g琼脂糖：0.5g对照组选择培养基实验组为什么用琼脂糖代替琼脂？怎么获得无菌的尿素溶液？

接种取0.1ml菌悬液

涂布分离

涂布分离

1、为什么要用琼脂糖代替琼脂配置固体培养基因为琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物。如果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮源，这样会在尿素固体培养上产生大量以非尿素为氮源的细菌，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选，故用纯化的琼脂糖而不用琼脂做固化剂思考题：

3、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现。细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中尿素水解，水解后产生氨，氨为碱性，酚酞在酸性环境里呈黄色，碱性里呈红色。培养基中酸碱指示剂产生颜色变化（变红），标志着存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株以尿素为氮源。