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K252a对内毒素诱导急性肺损伤大鼠的保护

作用

作者：张茂银，陈龙，成勤，张稳稳，刘苏，王光磊，刘功俭

【摘要】目的观察K252a（MLK3阻断剂）对内毒素性急性肺损

伤大鼠肺病理组织学改变及生存率的影响。方法采用尾静脉注射脂多

糖（lipopolysaccharide，LPS）复制内毒素性急性肺损伤模型。90

只大鼠随机分为6组（n=15）：对照组(control组)、LPS组、K252a50

μg/kg组（K50组）、K252a75μg/kg组（K75组）、K252a100μg/kg

组（K100组）和溶剂对照组（DMSO组）。模型制备成功后6h取肺脏

进行光镜检查，观察48h内大鼠死亡情况并比较累计生存率。结果48

h内LPS组、K50组、K75组和K100组以及DMSO组大鼠生存率分别为

6.3%、27%、72%、57%及6.7%。光镜下可见LPS组大鼠肺组织结构明

显被破坏，主要表现为肺泡内出血、肺间质水肿、肺泡萎陷以及肺组

织内大量炎性细胞浸润。与LPS组相比，预先应用K252a组肺组织的

损伤程度较轻微、肺间隔轻度增宽、无明显出血、少量炎性细胞浸润，

尤其K75组，减轻程度最明显。结论K252a延迟LPS大鼠死亡时间，

并呈现剂量依赖性，75μg/kgK252a剂量可以明显提高其生存率。

并可改善内毒素性急性肺损伤大鼠肺脏的病理组织学结果。

【关键词】K252a;MLK3;内毒素;急性肺损伤；大鼠;生存率

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急性肺损伤（acutelunginjury，ALI）/急性呼吸窘迫综合征

（acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS）是临床常见的危重

病，是重症监护治疗的重要课题。其本质是以炎症介质过度释放为特

征的肺部广泛炎症反应［1］。由于ALI/ARDS病因与发病机制的复杂性，

近年来尽管进行了大量的研究，但其病死率仍居高不下［2］。因此深

入了解并研究ALI/ARDS的发病机制，具有重要意义。本实验采用大鼠

尾静脉注射LPS复制内毒素性急性肺损伤模型，应用p38MAPK上游

MLK3的抑制剂K252a对内毒素性急性肺损伤大鼠进行干预，观察其

对大鼠肺脏病理组织学改变及生存时间的影响，旨在探讨K252a对急

性肺损伤有无保护作用，从而为抗炎治疗增添一条新的途径，还有助

于寻找对ALI/ARDS更有效的治疗方法。

1材料和方法

1.1实验动物及试剂成年雄性SD大鼠，体重200～250g，购

自中国科学院上海实验动物中心。LPS（E.coli，011:B4）、K252a、DMSO

（dimethylsulfoxide，二甲基甲酰胺）均购自美国Sigma公司。

1.2模型制备和分组实验动物随机分为6组（n=15）：对照组

（Control组），仅注射生理盐水；LPS组，经尾静脉注射LPS5mg/kg；

K252a50

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μg/kg组（K50组）、K252a75μg/kg组（K75组）和K252a100

μg/kg组（K100组），分别在注射LPS前30min尾静脉注射K252a50

μg/kg、75μg/kg、100μg/kg；溶剂对照组（DMSO组）在注射LPS

前30min尾静脉注射DMSO0.2ml。本实验中所选用药物剂量及给药

方式是依参照文献［3］、［4］及我们的预实验结果而定。

1.3病理学检查注射LPS后6h取适量肺组织，经4%甲醛溶液

固定，梯度乙醇脱水、石蜡包埋、切片，苏木精-伊红染色后，光镜下

观察病理改变。

1.4生存率分析为了证实K252a对急性肺损伤的保护作用，观

察各组大鼠48h内的生存