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第一讲基因工程
[基础知识系统化·]
知识点一基因工程的基本工具
知识点二基因工程的基本操作程序
知识点三蛋白质工程
2116
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[基本技能·问题化]
1.据两种限制酶的作用图示填空
(1)已知限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别
↓↓
为GAATTC和CCCGGG,在图中画出两种限制酶切割DNA后产
生的末端并写出末端的种类。
(2)①产生的是黏性末端;②产生的是平末端。
(3)EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶识别的碱基序列不同,切割位
点不同填“相同”或“不同”,说明限制酶具有专一性。()
2.观察下图所示过程,回答相关问题
(1)①是限制酶,②是DNA连接酶,二者的作用部位都是磷酸二
酯键。
(2)限制酶不切割自身DNA的原因:自身DNA不存在该酶的识
别序列或识别序列已经被修饰。
3.结合抗虫棉的培育过程图填空
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(1)Bt
从图中可以看出,目的基因是毒蛋白基因,使用的载体是
Ti质粒,将目的基因表达载体导入受体细胞的方法是农杆菌转化法。
(2)请写出两种检测目的基因是否表达的方法:抗原—抗体杂交
法、用棉叶饲喂棉铃虫。
4.填写蛋白质工程流程图中字母代表的含义
AB.C.D.E.
.转录,翻译,分子设计,氨基酸序列,预期功能。
考点一基因工程的操作工具
命题点(一)限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用
1.(2016·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了
EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列与切割位
点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切
点是唯一的)。
↓↓↓
——GAATTC————GGATCC————GATC——
——CTTAAG————CCTAGG————CTAG——
↑↑↑
图(a)
根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
4116
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(1)经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被
________酶切后的产物连接,理由是
____________________________________________________________
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