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实验五原种、栽培种培养基制备

原种即二级种，就是将试管中的母种，接入菌种瓶（袋）内，等菌丝长满后形成的菌

种。栽培种就是将原种再接入菌种瓶（袋）培养形成的三级种，也就是直接用于生产的菌种，

所以称之为栽培种。

一、实验目的和要求：

通过实验初步掌握原种、栽培种培养基的配料、装瓶（袋）、灭菌，并了解原种、栽培

种培养基的不同配方及不同的制作方法。

二、实验器材和用具：

卧式高压蒸汽灭菌锅、架盘天平、接种室（箱）、超净工作台、菌种瓶或菌种袋、接种

耙、塑料套环、锥形捣木、擦布、棉花、不锈钢锅、秤、盆、橡皮圈；

棉籽壳、麸皮、石膏、碳酸钙、白糖、过磷酸钙。

三、培养基配方：

1.棉籽壳培养基（适于多种食用菌）：

棉籽壳78%，麸皮20%，过磷酸钙1%，蔗糖1%，水约60%（约200%）。

2.木屑米糠培养基（适用于香菇、木耳等木腐生类食用菌）：

木屑（锯木屑）78%，米糠或麸皮20%，石膏1%，蔗糖1%，料水比为1:4~1:6，使

含水量达到60%，即用手握抓材料时指缝间现水而不滴水。

3.麦粒培养基（适用于平菇、猴头菇、金针菇等）：

麦粒100%，蔗糖1%，碳酸钙1%，水500L左右。

四、实验步骤：

1.棉籽壳培养基的配制：

拌料：根据计划生产原种、栽培种的数量，计算出各种原料的用量，分别称取后，将

不溶性辅料和主料搅拌均匀，将可溶性辅料加入水中溶解，逐渐泼入拌好的主料中搅

拌，继续加水拌料，拌料时，边加水边测含水量，以便控制水分，不至过多或不足。

含水量的测定：拌好料后，用手抓一把培养料，在手中紧握，手指缝中有水渗出可下

滴1-2滴水为宜，千万不能3-4滴，也不能没水滴。

装瓶（装袋）：菌种瓶口径3cm，容积750ml，菌种袋一般用12×26cm或14×28cm的

聚丙烯塑料袋，边装边捣实（但不宜过紧，太紧则透气性差，菌丝生长不良），以手按

结实有弹性为宜。

打孔：培养料装好后，用锥形木棒从瓶（袋）中央向下打一个洞，洞深离瓶（袋）底

部2-3cm，这种一是可以增加瓶（袋）内氧气，二是有助于菌丝沿着洞穴向下蔓延，

三是便于固定菌种块，不致游动而影响成活，有利于瓶下部菌丝生长良好。

擦瓶（袋）：打洞后，用湿毛巾或湿布将瓶（袋）口外粘附的培养料擦净，擦干，以免

接种后污染杂菌。

包扎：塞上棉塞，用牛皮纸将瓶（袋）口及棉塞包住，用绳或橡皮圈扎紧。

2．木屑米糠培养基

木屑米糠培养基的配制方法同棉籽壳培养基相似，只是含水量稍少些，用手抓一把培

养料在手中，手指缝中有水渗出而不下滴为准，装瓶（袋）时培养料的压实要比棉籽

壳稍松些，因木屑颗粒小，且能留有较多的空隙。

灭菌：包扎好的料瓶（袋）放入高压灭菌锅内进行灭菌。灭菌与手提式高压灭菌锅相

似，只是在1.5kg/cm2压力下，灭菌1-1.5h即可。

五、思考题：原种培养基装瓶（袋）后，用锥形木捣洞的目的是什么？

实验五（续）原种、栽培种接种及培养

母种扩大成原种，原种扩大成生产上直接生产种为栽培种。

一、实验目的和要求：

通过对原种、栽培种的扩大培养，基本掌握原种、栽培种接种操作技能，并培养学生

定期检查菌丝生长情况的观察能力和鉴别杂菌污染特征识别能力。

二、实验器材和用具：

接种箱（室）、超净工作台、菌种瓶（袋）架、酒精灯、镊子、75%酒精棉球、火柴、

标签纸。

三、实验步骤：

1．检查母种、原种有无杂菌污染或有怀疑的菌种去之。

2.原种接种法：接种要求在无菌室（箱），超净工作台内进行无菌操作。接种时要求动作

快而准确，以减少污染。

取斜面母种，用75%酒精棉球擦拭管外壁，在酒精灯火焰上灼烧管口，，用右手持接

种耙，灼烧，放在试管内侧，冷却，拔出菌种瓶（袋）上棉塞，右手小手指夹住，然后切

2

取1.5-2.0cm大小斜面菌种一块，通过酒精灯火焰上方，送入菌种瓶（袋）内，固定在接

种孔上，塞上菌种瓶棉塞。每支斜面试管可接种3-5瓶（袋），贴上标签。

3.原种恒温培养

接